绵羊环氧合酶-2受体(COX-2R)ELISA试剂盒
绵羊环氧合酶-2受体(COX-2R)ELISA试剂盒
酶联吸附法（ELISA）的原理是利用抗原或与酶的结合，形成酶标抗原或，保持其活性，同时又保留酶的活性。将抗原或与酶连接成酶标记抗原或，它既保留了活性，又保留了酶的活性；在测定时，把受检标本(含待测或抗原)和酶标抗原或按一定程序与结合在固相载体表面的抗原或起反应形成固相化抗原-酶复合物，用洗涤的使固相载体上形成的抗原-酶复合物与其它成分分离，结合在固相载体上的酶量与标本中受检的量成一定的比例，加入酶反应的底物后，底物被固相载体上的酶催化生为有色产物，通过定性或定量检测有色产物的量即可确定样品中待测的含量。
ELISA试剂盒的用法包括以下步骤：1.包被：用PH9.6的CBS包被液稀释包被抗原至5μg/ml，酶标板中每孔加入50μl，室温、4℃或37℃过夜包被。2.洗涤：弃包被液（拍干，再用无尘纸吸干），用PH7.2-7.4的1×PBST洗涤液洗板3次（每孔均要加满），每次3min~5min。3.封闭：每孔加封闭液（1%BSA）250μl，37℃封闭2h。4.洗涤：用1×PBST洗涤液洗板3次，每次3min~5min。5.加样：加入已经稀释好的样品，37℃反应1h。一般样本加入50-100μl，充分混匀。6.洗涤：用洗涤液洗板3次，每次3min~5min。7.加入酶标试剂：每孔加入100μl酶标溶液，37℃，1h。8.洗涤：用洗涤液洗板3次，每次3min~5min。9.显色：每孔先加入显色剂A液50μl，再加入显色剂B液50μl，37℃避光10-15min。10.终止及测定：加入50μl终止液，终止反应，用酶标仪在450nm波长处测OD值。
ELISA试剂盒适用行业ELISA试剂盒广泛应用于生命科学研究、临床医学和工业等领域。1.在生命科学研究领域，ELISA试剂盒可以用于检测细胞因子、、酶、等分子的含量和活性，用于学、学、分子生物学等研究领域。2.在临床医学诊断中，ELISA试剂盒可以用于检测中的标志物、、心肌酶等指标，用于临床诊断及监测。3.在食品安全检测中，ELISA试剂盒可以用于检测食品中的残留、残留等有害，用于食品检测和安全评估。4.在监测中，ELISA试剂盒可以用于检测中的化学、微生物等污染物，用于监测和污染治理。5.在动物防控中，ELISA试剂盒可以用于检测动物中的、抗原等指标，用于动物疫病防控和兽药残留检测。总之，ELISA试剂盒在许多行业中都有广泛的应用。
双夹心
本法主要用于检测大分子抗原。现以检测鸡传染性法氏囊病（IBDV）的双夹心ELISA为例介绍本法的操作程序。
① 加包被 → 4℃过夜，洗涤三次、抛干
② 加待检抗原 → 37℃ 30分钟，洗涤三次、抛干
③ 加酶标 → 37℃ 30分钟，洗涤三次、抛干
④ 加底物液 → 37℃ 15分钟，加终止液
⑤ 用ELISA检测仪测定OD值。
双夹心ELISA
此法与双夹心ELISA的主要区别在于：它是采用酶标抗检查多种大分子抗原，它不仅不必标记每一种，还可试验的性。此法的基本程序为：
① 加（Ab-1）包被 → 4℃过夜，洗涤三次、抛干
② 加待检抗原（Ag） → 37℃ 60分钟，洗涤三次、抛干
③ 加用非同种动物生产的特（Ab-2)→ 37℃ 60分钟，洗涤三次、抛干
④ 加入酶标抗Ab-2（AB-3）→ 37℃ 60分钟，洗涤三次、抛干
⑤ 加底物液 → 37℃ 20分钟，加终止液
⑥ 用ELISA检测仪测定OD值。
竞争ELISA
此法主要用于测定小分子抗原及半抗原，其原理类似于放射测定。其基本程序为：
① 包被 → 4℃过夜，洗涤三次、抛干
② 加入待检抗原及一定量的酶标抗原（对照孔仅加酶标抗原）→ 37℃ 60分钟，洗涤三次、抛干
③ 加底物液 → 37℃ 20分钟，加终止液
④ 用ELISA检测仪测定OD值。
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