鸡胆囊收缩素/肠促胰酶肽B受体(CCKBR)ELISA试剂盒
酶联吸附法(ELISA)的原理是利用抗原或与酶的结合,形成酶标抗原或,保持其活性,同时又保留酶的活性。将抗原或与酶连接成酶标记抗原或,它既保留了活性,又保留了酶的活性;在测定时,把受检标本(含待测或抗原)和酶标抗原或按一定程序与结合在固相载体表面的抗原或起反应形成固相化抗原-酶复合物,用洗涤的使固相载体上形成的抗原-酶复合物与其它成分分离,结合在固相载体上的酶量与标本中受检的量成一定的比例,加入酶反应的底物后,底物被固相载体上的酶催化生为有色产物,通过定性或定量检测有色产物的量即可确定样品中待测的含量。
ELISA90分钟一步法的优点主要包括:1.操作简单:该只需要一步操作即可完成,操作简单明了,易于。2.快速:ELISA90分钟一步法可以在短时间内完成,适合于大批量样品的快速检测。3.特高:该采用特定的或抗原进行固定和检测,因此具有较高的特。4.灵敏度高:ELISA90分钟一步法具有较高的灵敏度,可以检测出较低浓度的抗原或。5.重复性好:该的重复性,结果较为。6.安全性高:ELISA90分钟一步法不使用放射性同位素等有害,因此具有较高的安全性。需要注意的是,ELISA90分钟一步法也存在一些缺点,例如可能会受到非特因素的影响,结果不准确。此外,该的试剂成本较高,不适合于小规模样品的检测。
ELISA试剂盒的操作步骤如下:1.包被:用PH9.6的CBS包被液稀释包被抗原至5μg/ml,酶标板中每孔加入50μl,室温、4℃或37℃过夜包被。2.洗涤:弃包被液(拍干,再用无尘纸吸干),用PH7.2-7.4的1×PBST洗涤液洗板3次(每孔均要加满),每次3min~5min。3.封闭:每孔加封闭液(1%BSA)250μl,37℃封闭2h。4.洗涤:用1×PBST洗涤液洗板3次,每次3min~5min。5.结合一抗:用1×PBST缓冲液1∶1000稀释被检,每孔100μl,要设立阴性对照,37℃孵育1.5h。6.洗涤:同上。7.结合酶标二抗:每孔加1×PBST缓冲液1000倍稀释的酶标二抗羊抗鼠IgG-HRP(稀释倍数根据产品不同有所不同,可按说明书进行)50μl,37℃孵育1h.8.洗涤:同上。9.显色:每孔加底物溶液(TMB)50μl,置室温避光显色10min。10.待显色后,每孔加入50μl终止液(2mol/L H2SO4)终止反应。使用酶标仪读取450nm的OD值,以确定水平。以上步骤仅供参考,具体操作请根据实际情况和产品说明书进行。
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