葡萄糖激酶试剂盒_兔GCK试剂盒_兔葡萄糖激酶检测

葡萄糖激酶试剂盒_兔GCK试剂盒_兔葡萄糖激酶检测

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【产品名称】
通用名称：兔葡萄糖激酶（GCK）定量检测试剂盒（ELISA）
英文名称：Rabbit Glucokinase ELISA KIT

【预期用途】
仅供科研使用，定量检测血清、血浆、细胞培养上清液中兔葡萄糖激酶（GCK）的浓度。

【检验原理】
本试剂盒采用双抗体夹心酶联吸附试验（ELISA）。在预包被抗兔葡萄糖激酶（GCK）抗体（固相抗体）的微孔酶标板中，加入兔葡萄糖激酶（GCK）校准品和待测样本，再加入另一株HRP标记的抗兔葡萄糖激酶（GCK）抗体（酶标抗体），经过温育与充分洗涤，去除未结合的组分，在微孔板固相表面形成固相抗体-抗原-酶标抗体的夹心复合物。加底物A和B，底物在HRP催化下，产生蓝色产物，在终止液（2M 硫酸）作用下，终转化为黄色，在酶标仪上测定吸光度（OD值），吸光度（OD值）与待测样品中兔葡萄糖激酶（GCK）的浓度正相关。拟合校准品曲线，可以计算出样本中兔葡萄糖激酶（GCK）的浓度。

【试剂准备】
1、使用前，所有的组分都要至少复温30min，确保充分复温到室温。
2、浓缩洗涤液：从冰箱取出的浓缩洗涤液，会有结晶产生，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解。浓缩洗涤液与蒸馏水，按1:20稀释，即1份的浓缩洗涤液，添加19份的蒸馏水。
3、底物：底物液A和B，在使用前，按1:1体积充分混合，混合后15分钟内使用。


操作程序
1、所有试剂和组分都先恢复到室温，标准品、质控品和样品，建议做复孔。
2、按前面试剂准备中描述的方法，配制好试剂盒各种组分的工作液。
3、从铝箔袋中取出所需板条，剩余的板条用自封袋密封放回冰箱。
4、设置标准品孔、样本孔和空白孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL，样本孔加待测样本50μL，空白孔不加。
5、除空白孔外，标准品孔和样本孔，加入辣根过氧化物酶标记的检测抗体100μL。
6、用封板膜盖住反应板，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
7、揭开封板膜，弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置20s，甩去洗涤液，吸水纸上拍干。
8、如此重复4次（共洗板5次）。若使用自动洗板机，请按洗板机操作程序进行洗板，添加浸泡20s的程序，可以提高检测的精度。洗板结束，加底物前，要在干净不掉屑的纸上，充分拍干反应板。
9、将底物A和B按1:1体积充分混合，所有孔中加入底物混合液100μL。用封板膜盖住反应板，37℃水浴锅或恒温箱温育15min。
10、所有孔加入终止液50μL，在酶标仪上读取各孔吸光度（OD值）。

【检验结果的解释】
检测完成后，以标准品浓度做为纵坐标，对应的吸光度（OD值）作为横坐标，利用计算机软件，采用四参数Logistic曲线拟合（4-pl），创建标准曲线方程，通过样本的吸光度（OD值），利用方程计算样品的浓度值。
如果样品被稀释，通过上述方法测的的浓度值，要乘以稀释倍数，才是样品的终浓度。


使用前，请务必仔细阅读说明书，如有不清楚的，请拨打24h技术支持专线：或，咨询清楚再进行实验。