世通计量铂热电阻,广东肇庆热电偶校准-第三方仪器计量机构

世通仪器检测在全国有多个实验室欢迎来电咨询：陈工（广东，江苏，陕西，河南，重庆，四川，福建，安徽，浙江，江西等等）均可上门检测，校准证书带CNAS，出证书快，证书可加急，(主要业务:仪器计量，仪器校准，仪器检测，仪器校验，仪器外校，仪器校正，仪器测量，仪器测试，仪器标定，仪表计量，仪表校准，仪表检测，仪表校验，仪表外校，仪表校正，仪表测量，仪表测试，仪表标定，量具计量，量具校准，量具检测，量具校验，量具外校，量具校正，量具测试，量具测量，量具标定，器具计量，器具校准，器具检测，器具校验，器具外校，器具校正，器具测量，器具测试，器具标定，设备计量，设备校准，设备检测，设备校验，设备外校，设备校正，设备测量，设备测试，设备标定，仪器检验，仪表检验，量具检验，器具检验，设备检验)报价流程：发公司名称和仪器清单-收到清单开始报价-价格合适预排时间上门检测或者寄实验室检测-检测好1-5天出证书-寄回证书-付款。，我们要知道移液管与移液器按照各自的计量标准（JJG 196与JJG 646）标定（校准）的方法是完全一样的，即使用称重法对移液体积进行标定。

标定的操作大致描述如下：
1、在恒温恒湿环境下，将称量容器在分析天平上去皮；
2、吸取标称量程（即大量程）的蒸馏水，注入称量容器称重得到排出蒸馏水的重量Δm；
3、 在对应水温下将蒸馏水的重量Δm使用水的Kt值换算成体积，即V=Kt*Δm。Kt值的公式可以查看相应的计量标准。从公式中可以知道Kt值的主要影响因素为水的密度。

其次，从测量方法上来看，移液管与移液器标定体积的方式几乎是完全一样的，如果标称精度一致，真实操作蒸馏水以外的液体时精度表现是否完全一致呢？答案是否定的。
为了理解这一点我们需要知道移液管和移液器的结构与吸液原理的差异。移液管为简单的物理结构，一般为玻璃材质，以刻度确定体积。标定对应体积的对应刻度时，采取的方法即上述校准方法，对应体积的蒸馏水对应的质量是一定的，那么如果吸液后排出的蒸馏水的质量是“正确的“，代表吸液后排出蒸馏水的体积是”正确的（达到了标称值所允许的误差范围以内）“，那么吸液时蒸馏水所在凹液面的低点所代表的吸液体积是”正确的“，这个点也就是相应体积的刻度所在。一旦这个点确定了，就物理地确定了移液管内部的容积，这个容积之后几乎不随外部因素，比如液体密度，气压等因素变化而变化。

通常意义上的移液器为空气活塞式移液器，当移动移液按钮时，内部的活塞位置发生变化，进而产生负压，从而将液体吸入吸头内。吸液体积的确定是由内外压差和一系列其他的因素决定的，但是主要决定因素是内外压差。当标定时，如果吸取的蒸馏水排出后的质量是“正确的“（称重法），代表吸液后排出的蒸馏水的体积是“正确的（达到了标称值所允许的误差范围以内）”，那么代表了吸液的体积是“正确的”。因此，用蒸馏水确定了一把移液器的移液体积时，实际确定的是移液器内外压差以及一系列其他因素的综合作用正好能够吸取正确体积的蒸馏水。

这时，就很好理解，移液器在吸取不同类型液体，以及在不同环境条件下时，表现会有明显的不同。比如当环境条件没有变化，即压差是恒定的情况下，如果液体的密度不同于蒸馏水，即同等体积液体的质量不同于蒸馏水时，为了平衡内外压力，必然吸液的体积会有所不同。我们举个不太严谨的栗子来验证这一点。看一下结果如何？1、仪器与试剂
（1）仪器
使用10 mL刻度移液管一支；

10 mL移液器一支；

HandStep® Touch电子连续分液器一支；

移取75%的乙醇排至同一个10 mL A级容量瓶。

注：所有仪器均来自于德国BRAND，如图1所示。


图片
图1 从左至右分别为BLAUBRAND®刻度移液管（左一），Transferpette® S移液器（左二），HandStep® Touch电子连续分液器（右二），BLAUBRAND®容量瓶（右一）
（2）试剂

75% 乙醇。



2、实验步骤

步骤一、为了减少乙醇蒸发对实验的影响，制造合适实验环境。

我们把整个实验环境用塑料台布罩住，如图2所示，并将75%乙醇倒在烧杯中置于测试环境超过2个小时以尽可能饱和环境中乙醇的分压，降低操作时乙醇的蒸发速率。

图片
图2 实验环境

步骤二，对比用移液管（左）和移液器（右）分别吸取10 mL 75% 乙醇排入同一个容量瓶，如图3所示。
从图3可以看出，在相同条件下，吸取10 mL 75%乙醇排入同一个容量瓶，移液器比移液管明显多一些。我们知道乙醇的密度低于蒸馏水，即乙醇比水轻。因此在移液器内外压差一定的情况下，吸取乙醇的体积会比吸取水的体积更多。而移液管标定时直接标记的就是体积，因此，移液管吸取乙醇并排出之后的体积相比水的差异非常之少。排入容量瓶之后的结果验证了这一点。当然，由于乙醇的高挥发性，以及其他影响移液器吸液的因素存在，乙醇相比水的密度差异并不是完全按比例体现在移取体积差异上。

图片
图3 用移液管（左）和移液器（右）分别吸取的10 ml 乙醇结果对比

从上面的分析和实例来看，移液管确定体积的原理更直接，因此一般来说在相同标称精度之下，移液管相对移液器会有更优的实际移液精度表现。当然，影响移液管和移液器移液精度的因素有很多，我们并不能一概而论地说在任何情况下对于任何液体，标称精度相同的移液管实际移液精度表现都优于移液器。

我们上面比较的移液器为实验室常见的空气活塞式移液器。然而，还有另外一种移液器类别——外置活塞移液器。从吸液排液原理上来说，外置活塞移液器在移取高挥发，高粘度的液体时，表现会优于空气活塞式移液器。我们在进行本次比对实验时，结合移液管与空气活塞式移液器的实验结果，也使用了外置活塞原理的HandyStep Touch的移液模式做了一个比对。

步骤三、HandyStep® Touch配合10 mL PD吸头吸取10 mL 75% 乙醇排入一个10 mL A 级容量瓶，结果如图4所示。

图片

图4 使用HandyStep® Touch配合10 mL PD吸头移取10 mL 乙醇结果

结果表明，精度表现优于同量程的空气活塞式移液器。

诚然，移液器的量取范围更小，移液器的使用更为便捷，移液器的移液方式也更易于掌握，但是不可忽视的是移液器不论在精度定义还是在实际工作表现中，都不能完全与移液管相提并论。当然，提高移液器移液精度还有很多办法，比如使用低吸附吸头，比如就不同液体对于移液器进行再校准，比如使用外置活塞移液器。但是，总体而言，移液器的优势更多地体现在方便性与更小的量取范围上。

在实际工作中，应该根据实际的工作需要来决定使用移液管还是移液器进行液体的量取，如果是精度不能妥协的实验，恐怕移液管，尤其是胖肚移液管是，反之，实验速度与效率如果是考虑的要素，则移液器当仁不让。偏差调查中常见8大问题
偏差调查是任何GMP组织中重要的质量活动之一。在FDA和其他监管机构发布的观察、警告信和同意令中，它们也一直处于常被引用的问题列表的。(“无论批次是否已经分发，都没有审查[任何无法解释的差异][批次或其任何部件没有达到任何规格]。”)
显然，许多组织在偏差调查的编写和管理方面仍有改进的余地。以下几节列出了公司在进行偏差调查时所犯的常见错误以及如何避免这些错误。
1.不利用历史数据进行持续改进


随着时间的推移，通过调查收集到的信息包含了大量的数据，可用于不断改进、提高生产力和减少调查的再次发生。不幸的是，许多组织每年只审查这一数据一次，而且有些敷衍了事。一个良好的趋势过程是监测和积极应对发展中问题的一个重要因素。跟踪调查数据(根本原因、功能组、单元操作)将有助于持续监控设备中按产品、流程区域和功能组等发生的事件类型和根本原因。制定标准事件类别和可采取行动的根本原因清单，以便趋势偏差和调查数据。这份清单可以超过200份或更多，可以帮助调查人员以可诉的方式写出他们的根本原因。



图片
2.把人为错误作为根本原因


这是监管当局在其意见中引用的共同结论。将人为错误反复声明为根本原因是一个迹象，表明您的组织没有兴趣和/或资源来寻找真正的根本原因，并纠正重复出现的根本问题。人的错误可以是一个根本原因范畴，但它很少是真正的和可行动的根本原因本身。真正的根本原因通常是在其他领域，如程序(“步骤x.x不明确”)、培训(“由于SOP没有列入培训课程而没有被分配关于程序的培训”)、环境或机器(“设备设计和布局不当”)。
重要的是找到一个真正的、潜在的根源，并以可操作的方式描述它，以防止再次发生，并减少今后与人类错误相关的事件的数量。这类事件在生产力损失、合规和劳动力成本以及调查不合格行为所需的人力资源等方面给行业造成了惊人的损失。对于大型制药公司来说，偏差的平均成本高达数万美元。防止人为错误的再次发生不仅节省了组织的资金，而且降低了合规问题的可能性，包括监管结果。一些质量系统将不允许将人为错误用作根本原因，以防止组织无法识别和解决错误背后的真正根源(见下面的错误#3)。
例如，在许多(但肯定不是所有)人为错误事件中，所涉及的员工可以在错误变成偏差之前检测到错误。因此，在这种情况下，“发现问题的能力不足”可能是可采取行动的根本原因。由此产生的CAPA(纠正和预防行动)将是咨询或额外培训，是提高个人检测和修复错误的能力，或其他工作辅助或改进人机界面(HMI)，使操作者能够及时更好地发现问题，以防止出现偏差。仅仅就“注重细节”或“GMPS的重要性”进行咨询，作为一个立的CAPA来说，是不具体的，也是不够的。如果有人不理解GMP的重要性，他们就不应该在GMP环境下工作，而且他们肯定需要更多的培训。
3.没有找到可能的根本原因


导致根本原因的调查百分比-是衡量质量体系健康的一个很好的指标-这个百分比越高，越好。根本原因是多方面的。没有投入足够的时间和资源是其中之一。然而，各组织作出足够的努力，收集所有必要的事实和信息，但仍然找不到根本原因，这是非常普遍的。有时，这是调查人员技能的直接结果-他们可能没有受过充分的培训，或对所涉问题缺乏技术上的掌握。
然而，令人惊讶的是，调查得出的结论也令人惊讶，即无法查明“确定的”根本原因，尽管有所有必要的资料，而且结论是显而易见的。对事实的错误解释或不现实的确定性概念可能会使调查无法找到可能的根本原因。没有任何监管标准要求所有调查结论都是确定的。一个可能的根本原因是以调查为基础并以现有数据和资料为依据的，这就足够了。对于手头的问题，应该选择合适的RCA(根原因分析)工具。对于更困难的调查，Kepner-Tregoe或is-不是分析，通常可以从一系列不一致的事实中找出具挑战性的可能的根本原因。
4.找不到真正的根源

世通仪器检测可提供一下服务：世通仪器检测可提供包括长度类仪器校准、力学类仪器校准、电学类仪器校准、电磁学类仪器校准、无线电学类仪器校准、光学类仪器校准、理化类仪器校准、热工类仪器校准等计量领域的技术服务.
（1）校准仪器，计量仪器，校正仪器，校验仪器，检定仪器
（2）仪器校准，仪器计量，仪器校正，仪器校验，仪器检定，仪器外校，仪器检验。仪器校验
（3）设备校准，设备计量，设备校正，设备校验，设备检定，设备外校，设备检验，设备校验
（4）量具校准，量具计量，量具校正，量具校验，量具检定，量具外校，量具检验，量具校验
（5）测试仪器校准，测试仪器计量，测试仪器校正，测试仪器校验，测试仪器检定，测试仪器外校，测试仪器检验，测试仪器校验。流动相是影响液相色谱的关键因素。一个理想的液相色谱流动相溶剂应具有低粘度、与检测器兼容性好、易于得到纯品和低毒性等特征。液相色谱法中的流动相主要用水性溶剂、有机溶剂或它们的混合液，但是如何配制。选择配制的方法不同，分析结果特别是保留时间，是会有显著差别的。

液相色谱法中的流动相主要用水性溶剂、有机溶剂或它们的混合液，水性溶剂也常用于缓冲液。常因资料上表示的内容和实际的配制方法不同，而产生流动相的差异，影响了色谱图和分析结果。一般来说，溶剂的混合按体积比（V/V）或重量比（W/W）进行。溶液的体积因温度而变化，所以按重量比混合可调制再现性较好的混合溶剂，但由于操作较麻烦，通常多用体积比混合。只要没有特别标明，就可按体积比进行混合，但在特殊情况下，如胺类粘度高的溶液混合时，有时用重量—体积比（W/V）的方法。
a、流动相对样品具有一定的溶解能力，样品组分不会沉淀在柱中(或长时间保留在柱中)。流动相溶解度达不到要求时，尽量选用流动相中含有的比例较大的成分，以减轻进样对流动相的影响造成基线不稳。



b、流动相与样品不产生化学反应，选用流动相配置对色谱峰影响小。



c、流动相的黏度要尽量小，以便得到好的分离效果；降低柱压降，延长泵的使用寿命(可运用提高温度的方法降低流动相的黏度)。


d、流动相的物化性质要与使用的检测器相适应。如使用UV检测器，好使用对紫外吸收较低的溶剂配制。流动相组成溶剂均达不到要求时，选取的溶剂应在设定波长内无紫外吸收。

流动相受热，或者流动相不同组分混合时会有气体产生，气泡进入泵内引起压力波动，增加噪音，色谱图上出现毛刺。可试用下列方法解决问题：流动相再脱气；采用更有效的脱气方法或两种方法配合使用；改系统内混合为系统外预混合。HPLC所用流动相预先脱气，否则容易在系统内逸出气泡，影响泵的工作。


系统中气泡的产生：流动相本身存在，梯度淋洗混合后放出气泡；气泡的影响：存在于管路中，系统压力不稳定，实验结果有偏差；存在于单向阀中，易造成液体回流，流量不准确，甚至是不吸液存在于检测器中，出现鬼峰，影响检测准确性。所以做液相对流动相的气泡和杂质要求比较严格。气泡会影响柱的分离效率，检测器的灵敏度、基线稳定性，甚至使无法检测。（噪声增大，基线不稳，突然跳动）。此外，溶解在流动相中的氧还可能与样品、流动相甚至固定相（如烷基胺）反应。溶解气体还会引起溶剂pH的变化，对分离或分析结果带来误差。溶解氧能与某些溶剂（如，甲醇、四氢呋喃）形成有紫外吸收的络合物，此络合物会提高背景吸收（特别是在260nm以下），并导致检测灵敏度的轻微降低，但更重要的是，会在梯度淋洗时造成基线漂移或形成鬼峰（假峰）。在荧光检测中，溶解氧在一定条件下还会引起淬灭现象，特别是对芳香烃、脂肪醛、酮等。在某些情况下，荧光响应可降低达95%。在电化学检测中（特别是还原电化学法），氧的影响更大。除去流动相中的溶解氧将大大提高UV检测器的性能，也将改善在一些荧光检测应用中的灵敏度。


常用的脱气方法有：加热煮沸、抽真空、超声、吹氦等。对混合溶剂，若采用抽气或煮沸法，则需要考虑低沸点溶剂挥发造成的组成变化。


（1）氦气脱气：氦气脱气是很有效的脱气方法。氦气缓缓的通过流动相赶去溶入的空气，如果使用得当，在10min内可除去80%～90%的溶入气体。由于氦气在流动相中的溶解度极低，所以用氦气脱气保护的流动相可以认为是一个无气体溶解体系。其缺点是氦气价格比较昂贵，会增加检验成本。一般说来有机溶剂中的气体易脱除，而水溶液中的气体较顽固。在溶液中吹氦是相当有效的脱气方法，这种连续脱气法在电化学检测时经常使用。但氦气昂贵，难于普及。


（2）真空脱气：也是比较常用的脱气方法。现在多数企业都常用这种办法，贮液器被抽成部分真空，溶入的气体蒸发形成气泡溢出，其效果仅次于氦气脱气。象Agileng1200液相色谱使用的是在线脱气机。在线脱气只适合脱完气之后的流动相，在使用过程中的微量脱气。


（3）超声波脱气：将配制好的流动相连容器放入超声水槽中脱气10～20min。这种方法比较简便，又基本上能满足日常分析操作的要求，所以，目前仍广泛采用。这种方法只能除去30%的溶解气体，有时还会引起气体溶解度的增加。对氧敏感的检测器不宜用此法。超声脱气比较好，10~20分钟的超声处理对许多有机溶剂或有机溶剂/水混合液的脱气是足够了（一般500ml溶液需超声20~30min方可），关于超声时间问题众说纷纭，各实验室内5～30分钟不等，一般来说流动相组成为无机（缓冲盐溶液）时，5～15分钟即可，流动相为是水和有机容积混合时，超声时间要相对长一些，这个方法只能除去30%的溶解气体，时间的延长不和效果成正比，且其中气泡对色谱峰基线稳定性与信噪比有一定影响，一般来说影响不大，15min超声即可足够。此法不影响溶剂组成。超声时应注意避免溶剂瓶与超声槽底部或壁接触，以免玻璃瓶破裂，容器内液面不要高出水面太多。


（4）加热回流脱气：该方法虽然效果很好，但是适用范围较窄。对于有机溶剂或混合流动相不适合用此法，因为挥发性组分会损失掉，改变流动相的组成。


综合来说，用真空抽滤后，再用超声脱气还是常用的办法，用氦气的方法是效果好的办法，而在线脱气本身也是真空脱气，但它可以放到仪器上使用，是一种性的办法。


A.离线（系统外）脱气法不能维持溶剂的脱气状态，在你停止脱气后，气体立即开始回到溶剂中。在1~4小时内，溶剂又将被环境气体所饱和。


B.在线（系统内）脱气法无此缺点。常用的在线脱气法为鼓泡，即在色谱操作前和进行时，将惰性气体喷入溶剂中。严格来说，此方法不能将溶剂脱气，它只是用一种低溶解度的惰性气体（通常是氦）将空气替换出来。此外还有在线脱气机。


e、流动相沸点不要太低，否则容易产生气泡，导致实验无法进行。


f、在流动相配制好后，一定要进行脱气。除去溶解在流动相中的微量气体既有利于检测，还可以防止流动相中的微量氧与样品发生作用。

溶剂在使用定要用0.5μm的过滤器过滤，如果使用固体化学试剂（缓冲盐）配制流动相，过滤特别重要，不能让固体微粒污染泵，阻塞进样器和柱头过滤片。本实验室有水溶性和脂溶性两种过滤膜供选择（反光面朝上），过滤水溶性流动相时（如甲醇/水），先用1～2mL甲醇润湿过滤膜，有助于快速抽滤。

用普通溶剂瓶作流动相储液器应不定期废弃瓶子，后一次应用HPLC级的水或溶剂清洗，不能在清洗过程中留下污迹。
液相色谱是样品组分在柱填料与流动相之间质量交换而达到分离的目的，因此要求流动相具备以下的特点：

世通仪器检测可提供一下服务：世通仪器检测可提供包括长度类仪器校准、力学类仪器校准、电学类仪器校准、电磁学类仪器校准、无线电学类仪器校准、光学类仪器校准、理化类仪器校准、热工类仪器校准等计量领域的技术服务.
（1）校准仪器，计量仪器，校正仪器，校验仪器，检定仪器
（2）仪器校准，仪器计量，仪器校正，仪器校验，仪器检定，仪器外校，仪器检验。仪器校验
（3）设备校准，设备计量，设备校正，设备校验，设备检定，设备外校，设备检验，设备校验
（4）量具校准，量具计量，量具校正，量具校验，量具检定，量具外校，量具检验，量具校验
（5）测试仪器校准，测试仪器计量，测试仪器校正，测试仪器校验，测试仪器检定，测试仪器外校，测试仪器检验，测试仪器校验。
流动相用完，管道中吸入气体引起泵压力不稳。应经常观察储液器中流动相的量，加足流动相所有的样品分析完毕。输液管道上装沉子沉至瓶底，储液器盖上留一小孔正好夹住进液管，使其不能上下移动。



过滤器阻塞引起管道和泵腔空化，压力不稳。过滤器被微粒所阻塞或长霉，去掉过滤器后如果系统运转正常，说明已找出问题，换上新的过滤器则可。有时候换上新的过滤器仍然不畅，那就需要查查流动相的制备过程，或者换大孔径的过滤器。不管如何，流动相都需要重新过滤。流速过高、阻力大，造成空化现象，这是由于过滤器孔径、管道内径、流速和溶剂黏度等引起的。如果流速大于10mL/min，常会出现这种现象。


使用下列方法解决：

（1）使用低流速；

（2）换大孔径的过滤器；

（3）增加进液管道内径；

（4）抬高或加压储液器；

（5）不用过滤器，但流动相一定要先过滤；

（6）储液器盖子太紧，在储液器内形成真空，打出的流动相不连续。应松开盖子或留有1mm的缝隙；

（7）进液管道阻塞或弯曲使泵抽不到液，注意调整进液管道或更换新的。其它问题包括渗漏或接头松动、泵部件损坏等，都能引起供液不正常。
由于污染，噪音越来越大，检测器基线上升。污染物可能被泵以稳定的浓度打入系统，而再以稳定的浓度流出来，所以在色谱图中不出多余的峰。用梯度洗脱时弱流动相可以使污染物聚在柱顶，流动相强度增加后污染物可能被洗脱出来一个大的伪峰。有时基线噪音突然增大或突然提高，都是因为反复加进新的流动相或系统用得太久（通宵）所造成的。

有机溶剂和水性溶剂的混合液作为流动相是经常的，但由于混合方法不同，有时分析结果相差很大。如20mM磷酸钠缓冲液（pH2.5）90%与乙腈10%的混合液，混合比为9∶1时，20mM 磷酸钠缓冲液（pH2.5）90%与乙腈10%的体积比为9∶1，也就是可以解释为各自按体积比例的相当量称取后进行混合。另外，按10%乙腈解释，用20mM 磷酸钠缓冲液（pH2.5），将乙腈稀释调制也可以成立。在后者情况下，产生混合体积减少部分，余下的添加20mM 磷酸钠缓冲液。两者虽然没有太大的差别，但由于混合方式不同，分析结果，特别是保留时间，也会有显著的差别，这点注意。
对于用V/V＝1/1的表示配制乙腈水溶液，多按这种方法进行：用量筒测定乙腈500mL，用另一量筒测定水500mL，两种液体在瓶内充分摇晃混合。不过50%乙腈水溶液的表示时，同样也多是按上述方法配制，但查化学辞典时，实际上是按这种方法进行配制：将500mL乙腈，注入1L的量瓶中，量瓶边搅拌边加水，等待液温达到室温，用全量水，使溶液到1L。这样一来，用%表示和“V/V”体积比表示，终得出的流动相组成不同。也就是说，混合溶剂的密度，与由原溶剂密度计算的单纯平均值不相同，所以用上述两种方法调制的流动相组成差异。如在室温（25℃）附近水50mL和乙腈50mL混合时体积不是100mL，而有所减少，约为96mL。在一般情况下，多用操作简便的种方法。
双泵主要是在探讨流动相的配比或者梯度洗脱是比较方便，知道确切的液相色谱仪条件时，建议配好后使用的话，混合比较均匀，效果较好。在反相分析中，常用的有机溶剂和水的等浓度法，使用高压两元梯度系统，用两台泵将流动相分别输液后混合等封闭式混合时与预先在瓶内混合后用1台泵输液时，因混合后体积变化的不同，保留时间也有所不同，一定要注意。不仅是流动性的调制方法，试样溶液和其他溶液的调制也经常有上述问题，另外，在不同部门（医药部门或化工部门）各自都有自己的常识和习惯。在这种情况下，就要求各部门在制作相关溶液配制方法时能规定通则，定义设计溶液的调制方法，这样避免混乱，以在日常工作中更好地记住这些表示方法。
新加进的流动相有污染物或者流动相长霉，繁殖了细菌。脏的储液器会污染清洁的流动相。每种流动相备有的储液器，或者定期报废储液器。

低交联度的离子交换树脂和排阻色谱填料有时遇到某些有机相会溶胀或收缩，从而改变色谱柱填床的性质。碱性流动相不能用于硅胶柱系统。酸性流动相不能用于氧化铝、氧化镁等吸附剂的柱系统。

流动相污染来自这几个方面：试剂质量不高，玻璃器皿不合格；微生物的影响；配制流动相时操作不当等，因此要求高纯度化学试剂和HPLC级溶剂。要注意玻璃器皿按规定清洗干净；为防止微生物生长，每天要用甲醇清洗系统；怀疑系统内生长了微生物，可用稀硝酸冲洗即可（注意不要损坏柱和管道系统）；真空脱气时防止泵油带入流动相；用清洁的惰性塞子、搅棒、过滤器和玻璃器皿配制流动相；已经污染的流动相一定要废弃掉。