药效学大观霉素属于氨基糖苷类抗菌药,对多种革兰氏阴性杆菌,如大肠杆菌、沙门氏菌、志贺氏菌、变形杆菌等有中度抑制作用。对链球菌、肺炎球菌、表皮葡萄球菌和某些支原体(如鸡毒支原体、火鸡支原体、滑液支原体、猪鼻支原体、猪滑膜支原体等)敏感。对草绿色链球菌和金黄色葡萄球菌多不敏感。铜绿假单胞菌和密螺旋体通常耐药。肠道菌对大观霉素耐药较广泛,但与链霉素不表现交叉耐药性。
药动学内服后仅吸收7%,但在胃肠道内保持较高浓度。药物的组织浓度低于血清浓度。不易进入脑脊液或眼内,与血浆蛋白结合率不高。药物大多以原形经肾小球滤过排出。