超氧化物歧化酶（SOD）试剂盒(NBT法)可见分光光度法

超氧化物歧化酶（SOD）试剂盒(NBT法)可见分光光度法说明书

可见分光光度法 50管/48样

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定

产品名称：超氧化物歧化酶（SOD）试剂盒(NBT法)可见分光光度法

货号：LZ-S0145-A

规格 : 50管/48样

测试方法:可见分光光度法

产品分类：氧化与抗氧化系列

发货地：上海

测定意义：

SOD（EC 1.15.1.1）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，催化超氧化物阴离子发生岐化作用，生成H2O2和O2。SOD不仅是超氧化物阴离子清除酶，也是H2O2主要生成酶，在生物抗氧化系统中具有重要作用。

测定原理：

通过黄嘌呤及黄嘌呤氧化酶反应系统产生超氧阴离子(O2-)，O2-可还原氮蓝四唑生成蓝色甲臜，后者在560nm处有吸收；SOD可清除O2-，从而抑制了甲臜的形成；反应液蓝色越深，说明SOD活性愈低，反之活性越高。

需自备的仪器和用品

可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水

试剂的组成和配制：

提取液：液体 60mL×1 瓶，4℃保存；

试剂一：液体 15mL×1 瓶，4℃保存；

试剂二：液体 350μL×1 支，4℃保存；

试剂三：液体 10mL×1 瓶，4℃保存；

试剂四：粉剂×2 瓶，4℃保存。

 

NAD+和 NADH 的提取：

1 血清（浆）中 NAD+和 NADH 的提取NAD+的提取：按照血清（浆）体积（mL）：酸性提取液体积（mL）为 1：5~10 的比例（建议取约 0.1mL 血清（浆），加入 1mL 酸性提取液），60℃水浴 5min（盖紧，以防止水分散失）；冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心 10min；取 500μL 上清液，加入 500μL 碱性提取液使之中和，混匀，10000g 4 ℃离心 10min，取上清，置冰上待测。NADH 的提取：按照血清（浆）体积（mL）：碱性提取液体积（mL）为 1：5~10 的比例（建议取约 0.1mL 血清（浆），加入 1mL 碱性提取液），60℃水浴 5min（盖紧，以防止水分散失）；冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心 10min；取 500μL 上清液，加入 500μL 酸性提取液使之中和，混匀，10000g 4 ℃离心 10min，取上清，置冰上待测。

2 组织中 NAD+和 NADH 的提取：NAD+的提取：按照组织质量（g）：酸性提取液体积（mL）为 1：5~10 的比例（建议取约 0.1g组织，加入 1mL 酸性提取液），冰浴研磨，60℃水浴 5min（盖紧，以防止水分散失）；冰浴混匀，10000g 4 ℃离心 10min，取上清，置冰上待测。NADH 的提取：按照组织质量（g）：碱性提取液体积（mL）为 1：5~10 的比例（建议取约 0.1g组织，加入 1mL 碱性提取液），冰浴研磨，60℃水浴 5min（盖紧，以防止水分散失）；冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心 10min；取 500μL 上清液，加入 500μL 酸性提取液使之中和，混匀，10000g 4 ℃离心 10min，取上清，置冰上待测。

3 细胞或细菌中 NAD+和 NADH 的提取：NAD+的提取：先收集细胞或细菌到离心管内，弃上清，按照细菌或细胞数量（104个）：酸性提取液体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细菌或细胞加入1mL 酸性提取液），超声波破碎（冰浴，功率 20％或 200W，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次），60℃水浴 5min（盖紧，以防止水分散失）；冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心 10min；取 500μL 上清液，加入 500μL 碱性提取液使之中和，混匀，10000g 4 ℃离心 10min，取上清，置冰上待测。NADH 的提取：先收集细胞或细菌到离心管内，弃上清，按照细菌或细胞数量（104个）：碱性提取液体积（mL）500~1000：1的比例（建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 碱性提取液），超声波破碎（冰浴，功率 20％或 200W，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次），60℃水浴 5min（盖紧，以防止水分散失）；冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心 10min；取 500μL 上清液，加入 500μL 酸性提取液使之中和，混匀，10000g 4 ℃离心 10min，取上清，置冰上待测。

操作步骤:

1.加样

1. 除包被外都需45度加样

2.加样体积要准确

3.管底加样,不能加在管壁上

4.加样时不能产生气泡

2.温浴

1.加标本后和加结合物后,应立即放入按规定的反应温度的水浴箱。

2.各ELISA板不应叠在一起。

3.为避免蒸发,板上应加盖,或将板平放在底部垫有湿纱布的金属湿盒中。

4.加入底物后,反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温20℃,ELISA板可避光放在实验台上,以便 不时观察,待对照管显色适当时,即可终止酶反应。

3.洗涤

1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤,但却是决定实验成败的关键。

2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。

4.读板

1.阴性对照颜色极浅,在定性测定中一般可采用目视比色。

2.如用酶标仪测定结果,准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。

生化检测试剂盒常见问题：

在使用生化检测试剂盒时，可能会遇到一系列常见问题，这些问题主要涉及到试剂盒的使用、保存、有效期、样本处理以及实验操作等方面。以下是一些常见的问题及其解决方法：

一、‌测定原理‌：生化试剂盒通过化学反应或酶促反应测定样本中物质的含量或酶活性。常用的仪器包括分光光度计和酶标仪，它们的测定原理基于朗伯-比耳定律。土壤、水质、动植物组织、血清、细胞细菌、食品等样本均可进行测定‌。

‌二、选择不同规格的试剂盒‌：根据实验的实际情况选择合适的试剂盒。如果实验室有酶标仪且具备检测波长，可以选择微量法试剂盒；如果有分光光度计及相应规格的比色皿，则可以选择常量法或微量法试剂盒。建议购买前仔细阅读说明书，确认自备的仪器和试剂是否符合要求‌。

‌三、保存方法‌：收到试剂盒后，如果暂时不用，应按照外包装上指示的温度保存。拆开包装后，应按照每个试剂的保存温度进行保存，注意有些试剂忌反复冻融，有些粉剂溶解后性质不稳定‌。

四、‌有效期‌：一般生化试剂盒的有效期为6个月，也有特殊货号的有效期为1年。具体以实际收到货物的标签信息为准‌1。

‌五、样本处理‌：新鲜样本和冷冻样本都可用于大多数指标的测定，但有些生理活性物质容易降解，建议使用新鲜样本测定。对于冷冻样本，建议在-70℃或液氮中保存。样本在不同温度下的保存时间有所不同，例如4℃可保存一周，-20℃保存一个月，-80℃保存3个月‌。

‌六、土壤酶活性测定‌：对于土壤酶活性的测定，建议将鲜土风干并过筛后取样，以测定的重复性。若使用鲜土测定，需样本的颗粒大小一致且水分含量相似‌。

七、‌预测定‌：在进行正式测定前，建议选择2-3个预期结果差别较大的样本做预实验。通过预测定可以全面反映样品特点、试剂质量、仪器设备稳定性和操作规范性，确保正式测定结果真实可靠‌。

公司正在出售的产品：

CDK2 (Cyclin-Dependent Kinase 2 0.5mgCDK2 (Cyclin-Dependent Kinase 2) 周期素依赖激酶2(抗原)

APEX1 Protein Human 重组人 APEX1 / AP / APEx / Ref-1 蛋白 (His 标签)

MCPT1重组小鼠 MCPT1 蛋白 (His 标签) Protein

SFRP2 Protein Mouse 重组小鼠 sFRP2 蛋白 (His 标签)

CAMK1G重组人 CAMK1G / CLICK III / CaMKIgamma 蛋白 (His & GST 标签) Protein

小鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA试剂盒 ，英文名： GM-CSF ELISA Kit

大鼠巨噬细胞移动抑制因子(MIF)ELISA检测试剂盒RatMacrophageMigrationInhibitoryFactor,MIFELISAKit 96T/48T

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ratNoradrenaline,NAELISAKit大鼠去甲(NA)ELISA试剂盒规格：96T/48T

F.solaniRFLP基因分析试剂盒20次

Mouserudimealbovineserumalbumincheck-upELISA试剂盒小鼠的牛血清白蛋白残留检测ELISA试剂盒规格：96T/48T

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CAMK1G重组人 CAMK1G / CLICK III / CaMKIgamma 蛋白 (His & GST 标签) Protein

APEX1 Protein Human 重组人 APEX1 / AP / APEx / Ref-1 蛋白 (His 标签)

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超氧化物歧化酶（SOD）试剂盒(NBT法)可见分光光度法小鼠转酶(ALT)ELISA试剂盒 ，英文名： ALT ELISA Kit

大鼠骨成型蛋白2(BMP-2)ELISA检测试剂盒RatBonemorphogeneticprotein2,BMP-2ELISAKit 96T/48T

人α谷胱甘肽S转移酶(α-GST)试剂盒 Human α-GST ELISA Kit

英文名称MouseDPDELISAKit小鼠脱氧吩(DPD)规格：96T/48T

Susa固着液50毫升

rabbitInsulin,INSELISA试剂盒兔子(INS)ELISA试剂盒规格：96T/48T

100×A溶液(0.2%腺嘌呤)

10×YNB溶液(6.7%)

100×1/2改良型霍格兰营养液(3种母液，除菌)

10×MOPSMixture

10×GY溶液(10%甘油)

10×M溶液(5%甲醇)

10×PBS缓冲液

10×ACGU溶液