供应商 | 上海联祖生物科技有限公司 店铺 |
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认证 | |
报价 | 人民币 351.00元每盒 |
关键词 | 多聚半乳糖醛酸酶,可见分光光度法,试剂盒 |
手机号 | 13482402338 |
总监 | 何君联系时请一定说明在黄页88网看到 |
所在地 | 上海市嘉定区嘉罗公路1661 |
更新时间 | 2025-01-15 16:37:05 |
多聚半乳糖醛酸酶(PG)试剂盒可见分光光度法说明书
可见分光光度法 50管/24样
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
商品属性:
产品名称:多聚半乳糖醛酸酶(PG)试剂盒可见分光光度法
货号:LZ-S01403-A
规格 : 50管/24样
测试方法:可见分光光度法
产品分类:光合作用系列
发货地:上海
测定意义:
植物细胞壁是对抗病原真菌侵入的屏障,病原菌侵染植物过程中会分泌一系列细胞壁降解酶,多聚半乳糖醛酸反式消除酶是一种细胞壁降解酶,在病原菌致病过程中具有重要作用。
测定原理:
PGTE催化多聚半乳糖醛酸反应释放出不饱和醛酸,不饱和醛酸在232nm有特征吸光值,通过测定232nm下吸光值增加速率反映酶活性。
需自备的仪器和用品:
分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
试剂的组成和配制:
提取液:液体 60mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 40mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 6mL×1 瓶,4℃保存;
试剂三:粉剂×1 瓶,4℃保存;使用前加入 4mL 试剂一,60℃加热震荡溶解,用不完的试剂 4℃保存。
生化检测试剂盒操作步骤:
一、准备工具和环境:确保操作台面干净、整洁,这是进行科学实验的步。
二、仔细阅读说明书:这是使用试剂盒的基础,说明书包含了所有必要的信息和操作指南。
三、样本采集:按照说明书的指导,正确采集样本。不同类型的检测可能需要不同类型的样本,如血液、唾液或鼻涕等。
四、样本混合:将样本与试剂小心混合,注意轻柔操作,避免产生泡沫,以确保检测的准确性。
五、等待反应:混合后,耐心等待试剂盒的反应,这个时间可以用来进行其他活动,但不要着急,因为好的结果值得等待。
六、结果判读:时间到后,仔细判读结果。试剂盒通常会有明确的指示,告诉你如何根据显示的线条或颜色来判断结果。
NAD+和 NADH 的提取:
1 血清(浆)中 NAD+和 NADH 的提取NAD+的提取:按照血清(浆)体积(mL):酸性提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议取约 0.1mL 血清(浆),加入 1mL 酸性提取液),60℃水浴 5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min;取 500μL 上清液,加入 500μL 碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心 10min,取上清,置冰上待测。NADH 的提取:按照血清(浆)体积(mL):碱性提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议取约 0.1mL 血清(浆),加入 1mL 碱性提取液),60℃水浴 5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min;取 500μL 上清液,加入 500μL 酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
2 组织中 NAD+和 NADH 的提取:NAD+的提取:按照组织质量(g):酸性提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议取约 0.1g组织,加入 1mL 酸性提取液),冰浴研磨,60℃水浴 5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min;取 500μL 上清液,加入 500μL 碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
NADH 的提取:按照组织质量(g):碱性提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议取约 0.1g
组织,加入 1mL 碱性提取液),冰浴研磨,60℃水浴 5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min;取 500μL 上清液,加入 500μL 酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
3 细胞或细菌中 NAD+和 NADH 的提取:NAD+的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):酸性提取液体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 酸性提取液),超声波破碎(冰浴,功率 20%或 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次),60℃水浴 5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min;取 500μL 上清液,加入 500μL 碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心 10min,取上清,置冰上待测。NADH 的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):碱性提取液体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 碱性提取液),超声波破碎(冰浴,功率 20%或 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次),60℃水浴 5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min;取 500μL 上清液,加入 500μL 酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。
公司正在出售的产品:
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RabbitcoagulationfactorⅡ,FⅡELISA试剂盒兔子凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISA试剂盒规格:96T/48T
关键词:多聚半乳糖醛酸酶,可见分光光度法,试剂盒