革兰氏染色液培养基

革兰氏染色液培养基

货号：LZ-PYJ3661

英文名称：Gram Staining

产品规格：5mL*8

用途：用于细菌革兰氏染色试验

1.涂片经火焰固定，加(结晶紫溶液)溶液A染1分钟，用清水冲去染液。

2.加(液)溶液B染1分钟，水洗。

3.加(脱色液)溶液C，不时摇动玻片约10-30秒，至无紫色脱落为止，水洗。

4.加溶液D，染1分钟，水洗。

5.干后油镜镜检。阳性菌呈紫色、阴性菌呈淡红色。

配制过程中的常见问题分析：

01 培养基颜色不正确

（1）含有酸碱指示剂的培养基，若颜色不正确，通常是由于pH不正确导致的，加热过度、错误的灭菌方式等都会导致此项问题。

（2）加热过度导致某些成分分解或糖焦化，如SC培养基(SC增菌液)加热过度会变红，含糖量高的培养基，加热过度通常会出现颜色加深，呈焦糖色或棕褐色。

（3）某些成分变质，如血液久置易变黑，制成的平板颜色偏棕黑色。

02 培养基不凝固或凝固性差

（1）颗粒培养基称量错误

（2）琼脂分布不均匀

（3）培养基pH不正确

（4）培养基加热过度

（5）琼脂量不足

03 培养基产生沉淀

（1）某些培养基原本就含有不溶性沉淀，如TTB，MC培养基等，配方中含有大量不溶性碳酸钙。

（2）灭菌前未充分溶解，若灭菌前溶解不充足，灭菌后就会出现大量沉淀。

（3）pH不正确，偏酸或偏碱都有可能使培养基中的部分金属离子产生沉淀。

（4）水的纯度不够，天然水中含有较多的矿物盐离子，若未除净，则易与培养基中反应生成沉淀。

（5）添加剂加入温度不正确，卵黄、血液等对温度敏感的添加成分，若加入时温度过高或温差过大，易出现凝块。

（6）称量错误。

（7）试剂加入顺序不正确。

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注意事项：

1）培养基尽量使用新鲜培养基，2～4h内用完；

2）上海应使用预还原培养基，预还原24～48h更好；

3）可采用预还原灭菌法制作的培养基（用前于培养基中加入还原剂，如L-半胱氨酸、维生素C等，尽可能使预还原剂处于还原状态）；

4）液体培养基应煮沸10min，以驱除溶解氧，并迅速冷却，立即接种医。学教育网搜集整理；

5）厌氧菌的培养基均应营养丰富，并加有还原剂与生长刺激因子（血清、维生素K、氯化血红素、聚山梨酯-80等）。

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