人血小板相关补体3(PAC3)ELISA试剂盒仅供科研实验

2024-12-18 09:07:23

人血小板相关补体3(PAC3)ELISA试剂盒仅供科研实验

做好对照

正式试验时，应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件，待检样品应作一式二份，以实验结果的准确性。有时本底较高，说明有非特反应，可采用羊、兔或BSA等封闭。

实验条件的选择

在ELISA中，进行各项实验条件的选择是很重要的，其中包括:

（1）　固相载体的选择：许多可作为固相载体，如聚氯、聚、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。常用的是40孔聚凹孔板。不管何种载体，在使用前均可进行筛选：用等量抗原包被，在同一实验条件下进行反应，观察其显色反应是否均一性，据此判明其吸附性能是否良好。

（2）包被（或抗原）的选择：将（或抗原）吸附在固相载体表面时，要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0～9.6之间。吸附温度，时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃ 18～24小时。蛋白质包被的适浓度需进行滴定：即用不同的蛋白质浓度（0.1、1.0和10μg/ml等）进行包被后，在其它试验条件相同时，观察阳性标本的OD值。选择OD而蛋白量少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1～10μg/ml。

（3）　酶标记工作浓度的选择：用直接ELISA法进行初步效价的滴定（见酶标记部份）。然后再固定其它条件或采取“方阵法”（包被物、待检样品的参考品及酶标记分别为不同的稀释度）在正式实验里准确地滴定其工作浓度。

（4）　酶的底物及供氢体的选择：对供氢体的选择要求是、安全、有明显地显色反应，而本身无色。有些供氢体（如OPD等）有潜在的致癌作用，应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体，如TMB和ABTS是较为满意的供氢体。底物作用一段时间后，应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间，以10-30分钟为宜。底物使用液新鲜配制，尤其是H2O2在临用前加入。

进口分装：

检测范围和灵敏度不同，用量少时，可使用分装，前期是它的长久性不是很好。

试剂盒的曲线

试剂盒的曲线相关系数R≥0.98。

试剂盒重复性好，板内、板间变异系数均＜9 %。

试剂的组份都多给20%的富余量，确保完成48/96孔的检测，避免分次检测可能造成试剂量不足的情况。

检测及酶结合物的稀释度(均为1:30), 方便试验操作者准确地做稀释工作，实验结果的重复性。

白介素6是一种细胞因子,已被证实为B细胞分化因子.它是一种形成,它的特性,如肝细胞急性蛋白合成的诱导和基于和白介素3协同作用的等,也备受关注. 并且已证实白介素-6与病理学存在的相关关系.例如,报道多种的生长因子为白介素-6, 瘤细胞能合成白介素-6并表达白介素-6受体.此外, 白介素6在多种炎性和自身发挥重要的作用. 此试剂盒能高灵敏度的检测小鼠和细胞基质上清的白介素6 原理此试剂盒运用了两种特,洗板后加入TMB底物液显色,显色的强度与小鼠的白介素-6的量成正比. 检测范围 10.94的 700 pg/mL 预期用途

测定技术的基础在于抗原之间的特异结合反应，所以任何的诊断试剂离不开的原料，如抗原，酶等。以前用于测定的抗原通常为各种纯化抗原，而则为纯化抗原动物后的多克隆和使用杂交瘤技术的单克隆，而抗原或的标记物如酶标结合物则通过各种化学合成制备。近年来，随着分子生物学的发展，使用基因工程制备各种特殊的抗原或及其酶结合物等测定试剂几成为现实的新一代试剂，各种新型使用的测定也不断出现。

人血小板相关补体3(PAC3)ELISA试剂盒仅供科研实验

安全性

1．避免直接终止液和底物A、B。一旦到这些，请尽快用水冲洗。

2．实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。

3．不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

4．试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的品应丢弃，不可保存。

5．实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。

6．不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

7．使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。

8．使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

9．洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

10．底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光，避免长时间于光下。避免用手，有毒。实验完成后应立即读取OD值。

11．加入试剂的顺序应一致，以所有反应板孔温育的时间一样。

12．按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

标签：elisa试剂盒、酶联试剂盒

联系方式

上海笃玛生物科技有限公司

联系人杨燕燕
公司地址上海市宝山区河曲路118号6981室
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