兔N-乙酰α-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGLU)ELISA试剂盒

2024-06-27 09:14:20


    



 



 兔N-乙酰α-D-葡萄糖苷酶(NAGLU)ELISA试剂盒



ELISA试剂盒的操作步骤如下:1.包被:用PH9.6的CBS包被液稀释包被抗原至5μg/ml,酶标板中每孔加入50μl,室温、4℃或37℃过夜包被。2.洗涤:弃包被液(拍干,再用无尘纸吸干),用PH7.2-7.4的1×PBST洗涤液洗板3次(每孔均要加满),每次3min~5min。3.封闭:每孔加封闭液(1%BSA)250μl,37℃封闭2h。4.洗涤:用1×PBST洗涤液洗板3次,每次3min~5min。5.结合一抗:用1×PBST缓冲液1∶1000稀释被检,每孔100μl,要设立阴性对照,37℃孵育1.5h。6.洗涤:同上。7.结合酶标二抗:每孔加1×PBST缓冲液1000倍稀释的酶标二抗羊抗鼠IgG-HRP(稀释倍数根据产品不同有所不同,可按说明书进行)50μl,37℃孵育1h.8.洗涤:同上。9.显色:每孔加底物溶液(TMB)50μl,置室温避光显色10min。10.待显色后,每孔加入50μl终止液(2mol/L H2SO4)终止反应。使用酶标仪读取450nm的OD值,以确定水平。以上步骤仅供参考,具体操作请根据实际情况和产品说明书进行。






 



 



试剂盒性能



1. 特高:由于是抗原的特结合,因此试验的特很高,能够排除其他的。



2. 灵敏度高:由于酶的放大作用,使得试验的灵敏度大大,能够检测出微量的抗原或。



3. 操作简便:ELISA试验操作相对简单,容易,适合于大规模样本检测。



4. 适用范围广:可以用于检测各种抗原、和等生物分子。



 



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样品收集、处理及保存



1. :使用不含热原和内的试管,操作中避免任何细胞,收集血液后,3000 转离心 10 分钟将和红细胞迅速小心地分离。



2. :EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心 30 分钟取上清。



3. 细胞上清液:3000 转离心 10 分钟去除颗粒和聚合物。



4. 组织匀浆:将组织加入适量盐水捣碎。3000 转离心 10 分钟取上清。



5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解 冻并确保样品均匀地充分解冻。



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酶联吸附法(ELISA)的优点包括:1.高灵敏度:ELISA可以检测出微量的抗原或,其灵敏度通常比其他学更高。2.高特:ELISA仅与特定的抗原或结合,因此不易受到其他的,具有较高的特。3.快速:ELISA操作简便、快速,可以在短时间内结果.4.易操作:ELISA实验操作相对简单,易于化和自动化,因此适合于大规模样品的检测。5.应用范围广:ELISA可以用于检测多种生物分子,如蛋白质、多肽、等,因此在医学、生物领域广泛应用。6.无放射性核素污染:与放射测定法相比,ELISA不需要使用放射性核素,因此更为安全、环保。总之,ELISA是一种高灵敏度、高特、快速、易操作的学技术,具有广泛的应用前景。






 



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兔N-乙酰α-D-葡萄糖苷酶(NAGLU)ELISA试剂盒



酶联吸附法(ELISA)的优点包括:1.高灵敏度:ELISA可以检测出微量的抗原或,其灵敏度通常比其他学更高。2.高特:ELISA仅与特定的抗原或结合,因此不易受到其他的,具有较高的特。3.快速:ELISA操作简便、快速,可以在短时间内结果.4.易操作:ELISA实验操作相对简单,易于化和自动化,因此适合于大规模样品的检测。5.应用范围广:ELISA可以用于检测多种生物分子,如蛋白质、多肽、等,因此在医学、生物领域广泛应用。6.无放射性核素污染:与放射测定法相比,ELISA不需要使用放射性核素,因此更为安全、环保。总之,ELISA是一种高灵敏度、高特、快速、易操作的学技术,具有广泛的应用前景。



 



 



操作步骤



 



1)涂层:微孔板的孔涂上捕获或抗原。



2)封闭:孔内加入封闭剂(如牛白蛋白或羧纤维素),非特蛋



白质结合。



3)样本添加:加入含有未知浓度的目标抗原或的样本。



4)洗涤:去除未结合的。



5)检测添加:加入对特定抗原有特的酶标记检测。



6) 再次洗涤:再次去除未结合的检测。



7)底物添加:加入酶的底物,酶作用于底物产生颜色变化。



8)终止反应:加入终止溶液停止酶的反应(在某些类型的ELISA中需要)。



9) 读数:使用光谱光度计测定每个孔的吸光度(通常是在特定波长下),吸光度



与样本中抗原或的浓度成正比。



 



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标本的采集及保存



1.:全血标本请于室温放置2小时或4℃过一晚后于1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。 



2.:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8° C 1000 x g离心15分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。 



3.细胞物上清或其它生物标本:1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。 (注:标本溶血会影响**检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。) 



 



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结果分析



根据试剂盒提供的品浓度及对应的OD值,利用品绘制的曲线,计算待测样品的浓度。一般采用拟合曲线法或直线回归法进行数据处理,通过计算待测样品的浓度。



 



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免责声明



试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或生物体实验,否则所产生的一切后果,由实验者承担, 本公司概不负责。



严格按照说明书操作,不同批号不可交换使用,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。



 









标签:ELISA试剂盒指标ELISA试剂盒
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