牛白细胞球蛋白样受体亚家族B成员4(LILRB4)ELISA试剂盒

2024-11-04 07:15:49
牛白细胞球蛋白样受体亚家族B成员4(LILRB4)ELISA试剂盒 


试剂盒性能



1. 特高:由于是抗原的特结合,因此试验的特很高,能够排除其他的。



2. 灵敏度高:由于酶的放大作用,使得试验的灵敏度大大,能够检测出微量的抗原或。



3. 操作简便:ELISA试验操作相对简单,容易,适合于大规模样本检测。



4. 适用范围广:可以用于检测各种抗原、和等生物分子。



  



样品收集、处理及保存



1. :使用不含热原和内的试管,操作中避免任何细胞,收集血液后,3000 转离心 10 分钟将和红细胞迅速小心地分离。



2. :EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心 30 分钟取上清。



3. 细胞上清液:3000 转离心 10 分钟去除颗粒和聚合物。



4. 组织匀浆:将组织加入适量盐水捣碎。3000 转离心 10 分钟取上清。



5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解 冻并确保样品均匀地充分解冻。



 



 标记:良好的酶结合物取决于两个条件:即价的和高活性的酶。的活性和纯度对制备标记至关重要,因为特反应随活性和纯度的而增强。在酶标记中,的活性有所,故需要纯度高、效及抗原亲和力强的球蛋白使用亲和层析提纯的,可性,而且可稀释使用,非特吸附。



实验原理



      试剂盒采用双一步夹心法酶联吸附试验(ELISA)。往预先包被相关指标的的包被微孔中,依次加入标本、品、HRP标记的检测,经过温育并洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的。颜色的深浅和样品中的相关指标呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。



 



 



 







 牛白细胞球蛋白样受体亚家族B成员4(LILRB4)ELISA试剂盒



 



操作步骤



 



1)涂层:微孔板的孔涂上捕获或抗原。



2)封闭:孔内加入封闭剂(如牛白蛋白或羧纤维素),非特蛋



白质结合。



3)样本添加:加入含有未知浓度的目标抗原或的样本。



4)洗涤:去除未结合的。



5)检测添加:加入对特定抗原有特的酶标记检测。



6) 再次洗涤:再次去除未结合的检测。



7)底物添加:加入酶的底物,酶作用于底物产生颜色变化。



8)终止反应:加入终止溶液停止酶的反应(在某些类型的ELISA中需要)。



9) 读数:使用光谱光度计测定每个孔的吸光度(通常是在特定波长下),吸光度



与样本中抗原或的浓度成正比。



 




 





操作注意事项:1. 试剂盒保存在 2-8℃,使用前室温平衡 20 分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。3. 浓度为 0 的品可视为阴性对照或者空白;按照说明书操作时样本已经稀释 5 倍,终结果乘以5才是样本终浓度。4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作.5. 所有组分使用前充分摇匀。6. 若中英文说明书有误,请以中文说明书为准。7. 20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按 1:20 稀释,即 1 份的 20×洗涤缓冲液加 19 份的蒸馏水。8. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3辣根过氧化物酶的(HRP)活性。



标本的采集及保存



1.:全血标本请于室温放置2小时或4℃过一晚后于1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。 



2.:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8° C 1000 x g离心15分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。 



3.细胞物上清或其它生物标本:1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。 (注:标本溶血会影响**检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。) 



 




 



 



结果分析



根据试剂盒提供的品浓度及对应的OD值,利用品绘制的曲线,计算待测样品的浓度。一般采用拟合曲线法或直线回归法进行数据处理,通过计算待测样品的浓度。



 




 



 



 



免责声明



试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或生物体实验,否则所产生的一切后果,由实验者承担, 本公司概不负责。



严格按照说明书操作,不同批号不可交换使用,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。


结果判断: 绘制曲线:在Excel工作表中,以品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。


 

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