大鼠T细胞补剂(含刀豆球蛋白A)
货号:LZ-PYJ4482
英文名称:T-Cell Culture Supplement with ConA(IL-2 Culture Supplement), Rat
产品规格:100mL
本产品经过0.22μm过滤除菌,并通过无菌检测、CTLL-2细胞增殖检测和生物学活性检测,可直接作为补充剂加入到培养基中使用。
白介素-2(lnterleukin-2,IL-2)是由活化的T细胞产生的淋巴因子,IL-2可以诱导活化的T细胞的生长,促进T细胞产生淋巴因子,诱导细胞毒性T淋巴细胞的活性。本产品是一种富含IL-2和其他淋巴因子的混合物,来自伴刀豆球蛋白A(ConA)刺激的大鼠脾细胞培养物的条件培养基(RPMI 1640),含有10%胎牛血清、10mM HEPES以及10μg/mL左右的ConA。
配制过程中的常见问题分析:
01 培养基颜色不正确
(1)含有酸碱指示剂的培养基,若颜色不正确,通常是由于pH不正确导致的,加热过度、错误的灭菌方式等都会导致此项问题。
(2)加热过度导致某些成分分解或糖焦化,如SC培养基(SC增菌液)加热过度会变红,含糖量高的培养基,加热过度通常会出现颜色加深,呈焦糖色或棕褐色。
(3)某些成分变质,如血液久置易变黑,制成的平板颜色偏棕黑色。
02 培养基不凝固或凝固性差
(1)颗粒培养基称量错误
(2)琼脂分布不均匀
(3)培养基pH不正确
(4)培养基加热过度
(5)琼脂量不足
03 培养基产生沉淀
(1)某些培养基原本就含有不溶性沉淀,如TTB,MC培养基等,配方中含有大量不溶性碳酸钙。
(2)灭菌前未充分溶解,若灭菌前溶解不充足,灭菌后就会出现大量沉淀。
(3)pH不正确,偏酸或偏碱都有可能使培养基中的部分金属离子产生沉淀。
(4)水的纯度不够,天然水中含有较多的矿物盐离子,若未除净,则易与培养基中反应生成沉淀。
(5)添加剂加入温度不正确,卵黄、血液等对温度敏感的添加成分,若加入时温度过高或温差过大,易出现凝块。
(6)称量错误。
(7)试剂加入顺序不正确。
注意事项:
1)培养基尽量使用新鲜培养基,2~4h内用完;
2)上海应使用预还原培养基,预还原24~48h更好;
3)可采用预还原灭菌法制作的培养基(用前于培养基中加入还原剂,如L-半胱氨酸、维生素C等,尽可能使预还原剂处于还原状态);
4)液体培养基应煮沸10min,以驱除溶解氧,并迅速冷却,立即接种医。学教育网搜集整理;
5)厌氧菌的培养基均应营养丰富,并加有还原剂与生长刺激因子(血清、维生素K、氯化血红素、聚山梨酯-80等)。
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