DMSO(细胞冻存)

产品名称：DMSO(细胞冻存)

货号：LZ-PYJ4437

英文名称：见说明

产品规格：50mL|100mL

DMSO(细胞冻存)是经典的细胞冻存液的成分之一，用于各种哺乳动物原代细胞、传代细胞系、杂交瘤细胞等的冻存，该溶液经无菌处理。

细胞冷冻的原理在于尽可能降低细胞内的晶体形成，减少细胞内水凝固所形成的高浓度溶质对细胞造成的低温损伤，从提高细胞复苏时的存活率。细胞冻存的数量应复苏时低温保护剂获得1:10～1:20的稀释，稀释后的细胞浓度扔正常传代的细胞浓度为宜，这是因为当低温保护剂稀释10～20倍以后，该浓度一般不会对细胞造成毒性损伤。

随着实验室细胞培养的发展，除了原代培养之外，人工开发出来的细胞系的保存越来越重要。冷冻保存细胞系的优点如下：

减少基因漂移；

减缓细胞系的衰老；

稳定表型；

减少微生物污染及交叉污染机会等。

产品组分

DMSO(细胞冻存) 50mL     100mL

说明书    1份

保存：室温，有效期1年。

细胞计数器

细胞冻存管

低温冰箱或液氮

超净工作台

注意在超净工作台内无菌操作，尽量避免污染。

初次使用融化后可在4℃保存1个月，但应减少反复冻融的次数，以免失效。

杂交瘤细胞冻存时应定期复苏，检查细胞的活性和分泌抗体的稳定性。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

培养细胞至对数生长晚期，显微镜观察其外观、形态、有等，取状态良好的细胞进行冻存操作。如为贴壁生长细胞，用消化并用完全培养基终止消化，进行细胞计数；如为悬浮生长细胞，进行细胞计数。

500～1000g离心5min，弃上清。

一般按培养基：DMSO(细胞冻存)=9:1或者血清：培养基：DMSO(细胞冻存)=1:8:1等比例配制细胞冻存液。重悬细胞，使细胞浓度达到1～10×106/ml，置于冻存管中，密

闭、不要拧的太紧，避免弯曲变形。

一般遵循1℃/min的速率进行冷冻。亦可采用4℃ 20min，-20℃ 30min，-70℃过夜，后置于液氮罐中长期存储。

DMSO(细胞冻存)主要包括：

计算—称量—溶解—调pH—分装—灭菌——倒平板等。

计算：，培养基根据配方计算各种营养成分的用量。

称量：使用电子天平准确称取所需，遵循由含量低到含量高的称量原则。

溶解：将称好的成分放入相应玻璃容器中，加入所需量的水，加热使其完全溶解。对于液体培养基，建议使用纯化水。若配制固体培养基，则需称取适量的琼脂放进已称量好的培养基中，继续加热至琼脂全部溶解。

调pH值：待培养基稍冷却后，按配方要求调整pH值。使用10% NaOH溶液（或10% HCl溶液）调整所配培养基的pH。加碱（或酸）溶液时，应边滴加边搅拌，直至后调至要求的pH值。

分装：根据需要将培养基分装于不同的三角烧瓶、试管等。分装的量不宜超过容器的2/3以免灭菌时外溢。分装量根据使用目的和要求决定，但定量分装，便于应用。

灭菌：应按培养基配方中规定的条件及时进行灭菌。普通培养基采用121℃、15min高压湿热灭菌法，以灭菌效果和不损伤培养基的有效成份。

倒平板：灭菌后取出的固体培养基，根据需要可将试管立即斜放，冷凝后即成斜面培养基。液体培养基冷却后可直接根据需要接进菌种。

此外，还包括一些注意事项和操作细节，如使用度1/100的电子天平称取、避免使用铜或铁的容器溶化培养基、调整pH时考虑高压灭菌后的pH变化等。

1、上海准备好干粉培养基、三角瓶、药勺、无菌平皿、油性笔等。在瓶身上标注好培养基的

相关信息。

2、将三角瓶置于电子天平上，调零。按照需要用量，用药勺把干粉培养基添加到三角瓶中。

3、称量之后及时盖上培养基瓶盖，拧紧。用量筒量取适量的蒸馏水或者去离子水。

4、先加入小部分水以湿润干粉，避免粉尘扬起。再加入剩余的水量。充分摇匀。

5、将培养基加热煮至沸腾三次，应可见溶液澄清透亮，无明显琼脂颗粒挂壁，分层等现象。

6、培养基塞上透气硅胶塞，包上牛皮纸或者报纸，包扎好。放入高压灭菌锅中灭菌。（按需设定灭

菌温度、时间）

7、暂时不使用的培养基，可以放入50℃烘箱或者水浴中保温。倒平板时，在超净工作台或

生物安全柜中准备好无菌平皿、记号笔等。

8、拆开包装后，将无菌培养皿倒置，在底部边缘写上平板相关信息。

9、将标记好的无菌平皿翻转过来，当培养基温度下降到50℃左右时，倾倒培养基。

10、倒完后可轻轻圆周摇晃平板三圈，使平板边缘整齐。将平板铺开可加速琼脂冷却凝固。

11、颗粒培养基使用之前，将平板倒置于无菌实验室内的烘箱中，55℃、15 分钟。烘干平板表面水分。

12、将暂时不使用的平板用报纸包成筒状，用记号笔标清楚平板的种类、配制日期。

13、然后放进2-8℃的冰箱中保存。用时取出放置室温下平衡，使用前50℃烘箱烘10 分钟。

人1,4,5-三(IP3)试剂盒ELISASideroflexin 4(SFXN4)ELISA Kit

人干扰素诱导T细胞趋化因子(ITAC/CXCL11)试剂盒 ELISAREST Corepressor 2(RCOR2)ELISA Kit

人P选择素(P-Selectin/CD62P/GMP140)试剂盒 ELISAO-6-guanine DNA transferase(MGMT)ELISA Kit

人CD30分子(CD30)试剂盒 ELISANeuronatin(NNAT)ELISA Kit

人乳腺癌易感蛋白1(BRCA-1)试剂盒 ELISALunapark(LNP)ELISA Kit

人BH3结构域凋亡诱导蛋白(Bid)试剂盒 ELISAG Antigen 7(GAGE7)ELISA Kit

人I 型胶原蛋白(COL I)试剂盒ELISAGamma-Ltropic Hormone(gLPH)ELISA Kit

人CD82分子(CD82)试剂盒ELISAV-Jun Sarcoma Virus 17 Oncogene Homolog(JUN)ELISA Kit

人5羟色胺/血清素/血清胺(5HT/ST)抗体(IgM)试剂盒ELISATATA Box Binding Protein Associated Factor 13(TAF13)ELISA Kit

人球蛋白G Fc段受体Ⅱ(FcγRⅡ/CD32) ELISA试剂盒 Sentan(SNTN)ELISA Kit

人白介素27(IL-27)ELISA试剂盒 RAD23 Homolog B(RAD23B)ELISA Kit

人单核细胞趋化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA试剂盒 N-Acetylglutamate Synthase(NAGS)ELISA Kit

人胶质细胞系来源的神经营养因子(GDNF)ELISA检测试剂盒 NSFL1 Cofactor(NSFL1C)ELISA Kit

DMSO(细胞冻存)人P27蛋白(P27)ELISA检测试剂盒 Meichroacidin(MCA)ELISA Kit

人可溶性转铁蛋白受体(sTfR)ELISA检测试剂盒 Fc Fragment Of IgG Low Affinity IIIa Receptor(FcgR3A)ELISA Kit

人Ⅰ型胶原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA检测试剂盒 Fission 1(FIS1)ELISA Kit

人抗细胞膜DNA抗体(cmDNA)ELISA检测试剂盒 Cytospin B(CYTSB)ELISA Kit

人抗内因子抗体(IFA)ELISA检测试剂盒 Cluster Of Differentiation 226(CD226)ELISA Kit