NADH氧化酶检测试剂盒NADH氧化酶含量测试盒(50管/48样)

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测定步骤：

1、分光光度计预热30min以上，调节波长至600nm，蒸馏水调零。

2、样本测定

（1）试剂四、试剂五和试剂六于37℃（哺乳动物）或25℃（其它物种）孵育5min。

（2）在1mL石英比色皿中加入40μL样本、700μL试剂四、100μL试剂五和160μL试剂六，混匀，记录600nm处20s时吸光值A1和 1min20s后的吸光值A2，计算ΔA=A1-A2。

NOX活力单位的计算

1、血清（浆）NOX活力的计算:

单位的定义：每mL血清（浆）在每mL反应体系中每分钟A600变化0.01定义为一个酶活力单位。

NOX（U/mL）＝ΔA×V反总÷V样÷0.01÷T=2500×ΔA 

2、组织、细菌或细胞中NOX活力的计算:

（1）按样本蛋白浓度计算：

单位的定义：每mg组织蛋白在每mL反应体系中每分钟A600变化0.01定义为一个酶活力单位。

NOX（U/mg prot）=ΔA×V反总÷（V样×Cpr）÷0.01÷T=2500×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

（2）按样本鲜重计算：

单位的定义：每g组织在每mL反应体系中每分钟A600变化0.01定义为一个酶活力单位。

NOX（U/g 鲜重）=ΔA×V反总÷(W× V样÷V样总)÷0.01÷T=505×ΔA÷W

（3）按细菌或细胞密度计算：

单位的定义：每1万个细菌或细胞在每mL反应体系中每分钟A600变化0.01定义为一个酶活力单位。

NOX（U/104 cell）=ΔA×V反总÷(500×V样÷V样总)÷0.01÷T=1.01×ΔA

V反总：反应体系总体积，1mL； V样：加入样本体积，0.04mL；V样总：加入提取液体积，0.202 mL；T：反应时间，1 min；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量；500：细胞或细菌总数，500万。

NADH氧化酶检测试剂盒

注    意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定

需自备的仪器和用品：

可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰、蒸馏水