用于蛋白质纯化的5种生物缓冲液

蛋白质纯化的一般原则
蛋白纯化要利用不同蛋白间内在的相似性与差异，利用各种蛋白间的相似性来除去非蛋白物质的污染，而利用各蛋白质的差异将目的蛋白从其他蛋白中纯化出来。每种蛋白间的大小、形状、电荷、疏水性、溶解度和生物学活性都会有差异，利用这些差异可将蛋白从混合物如大肠杆菌裂解物中提取出来得到重组蛋白
生物缓冲剂的更换
虽然更换缓冲液不能提高蛋白纯度，但它却在蛋白纯化方案中起着极其重要的作用。不同的蛋白纯化方法需要不同pH及不同离子强度的缓冲液。蛋白纯化的每一步都会造成目的蛋白的丢失，缓冲液平衡的步骤尤甚。蛋白会结合在任何它能接触的表面上，剪切力、起泡沫和离子强度的变化很容易让蛋白失活，以下介绍5种用于蛋白质纯化生物缓冲液。
1) TRIS缓冲剂
◆用于阴离子交换色谱
◆用于凝胶电泳缓冲液（TAE或TBE）
◆用于制备Laemmli缓冲液，用于SDS-PAGE中蛋白质样品的变性和上样
◆不适合与二辛可宁酸（BCA）测定一起使用
◆可能会干扰蛋白质测定的Bradford染料结合法
2) TRIS-HCL缓冲剂
◆用于疏水相互作用色谱（HIC）作为分离和透析溶液的成分
◆用于离子交换色谱的上样
◆用于亲和层析底物溶液
◆作为洗脱缓冲液成分用于SDS-PAGE
3) BIS-TRIS缓冲剂
◆用作电泳缓冲液、凝胶缓冲液、样品缓冲液等不同类型的电泳
◆与ACES缓冲液一起用作凝胶电泳的电泳缓冲液（BIS-TRIS/ACES）
◆用于琼脂糖凝胶电泳
◆用作阴离子交换色谱、核磁共振光谱和X射线晶体学的缓冲剂。
◆被认为是高毒性缓冲剂二甲胂酸的替代品。
◆与人肝脏脂肪酸结合蛋白（FABPs）相互作用，影响蛋白质动力学。
◆与Pb2+、Cu2+形成强络合物，与其他普通金属相互作用弱。
4) MOPS缓冲剂
MOPS 不仅是蛋白质纯化和提取的 pH 缓冲剂，也是细菌、酵母和哺乳动物细胞缓冲培养基的成分，也是琼脂糖凝胶电泳分离 RNA 的佳运行缓冲液。由于缺乏与大多数金属离子形成螯合物的能力, 在制备含有金属离子的溶液时，推荐使用 MOPS 作为非配位缓冲液5) PIPES用途
5）TES缓冲剂
◆用作酶测定的缓冲液
◆用于凝胶过滤层析和亲和层析 
作为的生物缓冲液制造商，德晟生产 30 多种缓冲剂，提供多种包装选择以及良好的售后服务。如果您对产品有任何要求，请随时与我们联系！