湖北武汉生产销售批发牛肉蛋白胨

牛肉蛋白胨
酿酒发酵
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牛肉膏是采用新鲜牛肉经过剔除脂肪、消化、过滤、浓缩而得到的一种棕黄色至棕褐色的膏状物，为微生物提供碳源、能源、p酸盐和维生素
蛋白胨是将肉、酪素或明胶用酸或蛋白酶水解后干燥而成的外观呈淡黄色的粉剂，富含有机氮化合物，也含有一些维生素和糖类，可以作为微生物培养基的主要原料，主要提供氮源和维生素。

基础培养基的制备方法：
原理：
①碎牛肉和水混合置冰箱内浸一夜后，饲料级蛋白胨，可使溶解性蛋白质渗出，溶于水中，Bacteria的生长需要这种溶解性蛋白质。经加热后，可将凝固性蛋白质凝固，如加热不足，蛋白质未完全凝固，则培养基无法滤清。
②牛肉的主要营养料为蛋白质，并有少量生长因子、碳水化合物及盐类，故宜加入一定量之蛋白胨及lv化钠，以补充Bacteria的营养需要。
成分：新鲜瘦牛肉 500g、蛋白胨10g、lv化钠5g、蒸馏水 1000ml
制作过程：
①取新鲜瘦牛肉取其筋膜及脂肪，绞碎。
②500g碎肉加蒸馏水1000ml，混合后，置冰箱过夜（如无冰箱，可缩短浸泡时间，以免变质），次日取出煮沸30分钟，使肉渣完全凝为块状。
③粗布或厚纱布压去其汁，发酵蛋白胨，补足失去水份
④于上述肉汁加蛋白胨10g、lv化钠5g、搅拌，使其完全溶解，校正PH为7.4―7.6。
⑤分装于三角烧瓶或试管里，厂家，15磅20分钟高压灭菌，即成清晰棕黄色肉浸液。
用途：用做一般Bacteria培养，或作其他培养基的基础液。


牛肉膏蛋白胨培养基的特点及制作步骤
牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用广泛和普通的细菌基础培养基，有时又称为普通培养基。它含有牛肉膏、蛋白胨和NaCl。其中牛肉膏为微生物提供碳源和能源，p酸盐、蛋白胨主要提供氮源，而NaCl提供无机盐。在配制固体培养基时还要加入一定量琼脂作凝固剂。琼脂在常用浓度下96℃时溶化，一般实际应用时在沸水浴中或下面垫以石棉网煮沸溶化，以免琼脂烧焦。琼脂在40℃时凝固，通常不被微生物分解利用。固体培养基中琼脂的含量根据琼脂的质量和气温的不同而有所不同。

由于这种培养基多用于培养细菌，因此，要用稀酸或稀碱将其pH调至中性或微碱性，以利于细菌的生长繁殖。

牛肉膏蛋白胨培养基的配方如下：

牛肉膏 3g

蛋白胨 10g

NaCl 5g

琼脂 15—20g

水 1000ml

pH 7．4—7．6

三、器材

牛肉膏，蛋白胨， NaCl，琼脂；

1mol/L NaOH， 1mol/L HCl；

试管，三角烧瓶，烧杯，量筒，玻棒，培养基分装器，扭力天平，牛角匙，高压蒸汽灭菌锅，pH试纸（ pH 5．5—9．0），棉花，牛皮纸，记号笔，麻绳，纱布等。


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四、牛肉膏蛋白胨培养基的制作步骤

1．称量

按培养基配方比例依次准确地称取牛肉膏、蛋白胨、NaCl放入烧杯中。牛肉膏常用玻棒挑取，放在小烧杯或表面皿中称量，用热水溶化后倒入烧杯。也可放在称量纸上，称量后直接放入水中，这时如稍微加热，牛肉膏便会与称量纸分离，然后立即取出纸片。蛋白胨很易吸潮，在称取时动作要迅速。另外，称药品时严防药品混杂，一把牛角匙用于一种药品，或称取一种药品后，洗净、擦干，再称取另一药品，瓶盖也不要盖错。

2．溶化

在上述烧杯中可先加入少于所需要的水量，用玻棒搅匀，然后，在石棉网上加热使其溶解。待药品完全溶解后，补充水分到所需的总体积。如果配制固体培养基，将称好的琼脂放入已溶化的药品中，再加热溶化，在琼脂溶化的过程中，需不断搅拌，以防琼脂糊底使烧杯破裂。后补足所失的水分。

3．调pH

在未调pH前，先用精密pH试纸测量培养基的原始pH值，如果pH偏酸，用滴管向培养基中逐滴加入1mol/L NaOH，边加边搅拌，并随时用pH试纸测其pH值，直至pH达7．6。反之，则用1mol/L HCl进行调节。注意pH值不要调过头，以避免回调，否则，将会影响培养基内各离子的浓度。

对于有些要求pH值较的微生物，其pH的调节可用酸度计进行（使用方法，可参考有关说明书）。

4．过滤

趁热用滤纸或多层纱布过滤，以利结果的观察。一般无特殊要求的情况下，这一步可以省去（本实验无需过滤）。

5．分装

按实验要求，可将配制的培养基分装入试管内或三角烧瓶内。分装装置见图Ⅴ-1。

分装过程中注意不要使培养基沾在管口或瓶口上，以免沾污棉塞而引起污染。

(1)液体分装分装高度以试管高度的1/4左右为宜。

(2)固体分装分装试管，其装量不超过管高的1/5，灭菌后制成斜面，如图Ⅴ-2。分装三角烧瓶的量以不超过三角烧瓶容积的一半为宜。

(3)半固体分装试管一般以试管高度的1/3为宜，灭菌后垂直待凝。

6．加塞

培养基分装完毕后，在试管口或三角烧瓶口上塞上棉塞，以阻止外界微生物进入培养基内而造成污染，并有良好的通气性能（棉塞制作方法附本实验后面）。

7．包扎

加塞后，将全部试管用麻绳捆扎好，再在棉塞外包一层牛皮纸，以防止灭菌时冷凝水润湿棉塞，其外再用一道麻绳扎好。用记号笔注明培养基名称、组别、日期。三角烧瓶加塞后，外包牛皮纸，用麻绳以活结形式扎好，使用时容易解开，同样用记号笔注明培养基名称、组别、日期。

8．灭菌

将上述培养基以1．05kg/cm2（15磅/英寸2），121．3℃， 20分钟高压蒸汽灭菌。如因特殊情况不能及时灭菌，则应放入冰箱内暂存。

9．搁置斜面

将灭菌的试管培养基冷至50℃左右，将试管棉塞端搁在玻棒上，搁置的斜面长度以不超过试管总长的一半为宜。

10．无菌检查

将灭菌的培养基放入37℃的温室中培养24—48小时，以检查灭菌是否。