蛋白酶生产加工,碱性蛋白酶

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碱性蛋白酶,又称丝氨酸蛋白酶。常见的有两种,一为Novo蛋白酶,另一为Carsberg蛋白酶,两者的性质和构造相近,分别含275和274个氨基酸残基,由一条多肽链构成。在pH6~10下稳定,低于6或大于11时很快失活。其活性中心含丝氨酸,故称丝氨酸蛋白酶 [1] 。它不但能水解肽键, 还具有水解酰胺键、酯键以及转酯和转肽的功能。由于酶的专一性,它只能对蛋白质水解,不能作用于淀粉、脂肪等物质。
外观一般呈粉末状,也有部分呈微球状

主要应用领域:洗涤剂、制革、丝绸、饲料、医药、食品、环保等 [2]
其应用主要围绕其水解蛋白质肽键的功能展开,生产生活中,有几个主要的需求:1 使复杂的大分子蛋白质结构变成简单的小分子肽链或者氨基酸,从而变得易于吸收或洗去,比如食品、洗涤剂、饲料等领域。2 部分破坏蛋白质结构,使物质组分之间实现分离,这在皮革、丝绸等含蛋白质丰富的材料加工时十分有效,3 促进环境污染物降解,用于环保领域 4 蛋白酶既能催化水解反应,也能催化其逆反应,而且具备高度的活性和专一性,非常适合医药工业对某些特定分子的生产需求。

胰蛋白酶的作用是使细胞间的蛋白质水解从而使细胞离散。不同的组织或者细胞对胰酶的作用反应不一样。胰酶分散细胞的活性还与其浓度、温度和作用时间有关,在 pH 为 8.0 、温度为 37℃ 时,胰酶溶液的作用能力强。使用胰酶时,应把握好浓度、温度和时间,以免消化过度造成细胞损伤。因 Ca2+ 、 Mg2+ 和血清、蛋白质可降低胰酶的活性,所以配制胰酶溶液时应选用不含 Ca2+ 、 Mg2+ 的 BSS ,如: D-Hanks 液。终止消化时,可用含有血清培养液或者胰酶抑制剂终止胰酶对细胞的作用

1. 称取胰蛋白酶:按胰蛋白酶液浓度为 0.25 %,用电子天平准确称取粉剂溶入小烧杯中的双蒸水(若用双蒸水需要调 PH 到 7.2 左右)或 PBS ( D-hanks )液中。搅拌混匀,置于 4℃ 内过夜。
2. 用注射滤器抽滤消毒:配好的胰酶溶液要在超净台内用注射滤器( 0.22 微米微孔滤膜)抽滤除菌。然后分装成小瓶于 -20℃ 保存以备使用。
蛋白酶是重要的一种工业酶制剂,能催化蛋白质和多肽水解,广泛存在于动物内脏、植物茎叶、果实和微生物中。在干酪生产、肉类嫩化和植物蛋白改性中都大量的使用蛋白酶。此外,胃蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、羧肽酶和氨肽酶都是人体消化道中的蛋白酶,在它们的作用下,人体摄入的蛋白质被水解成小分子肽和氨基酸。
酸性蛋白酶是指蛋白酶具有较低的适pH,而不是指酸性基团存在于酶的活性部位,酸性蛋白酶的适PH从2左右(胃蛋白酶)到4左右。从酶的活力-PH曲线分析,在酶的活性部位中含有一个或更多的羧基。这一类蛋白酶中研究的是胃蛋白酶。

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