大豆不仅营养丰富,原料成本低,而且我国大豆资源丰富,大豆年产量约164万t,占世界总产量的9%,居第3位。大豆蛋白多肽不仅具有大豆的营养成分,而且具有多种生理功能和物理特性,易于消化、吸收。可广泛应用于食品、医药、日用化工等领域。
乳清蛋白的水解多肽,不仅可以提高蛋白功能性,还具有改善产品的起泡性、溶解性、胶凝性、乳化性等物理性质 [5] 。其生理功能有:吸收率上升。小肽比蛋白质更容易、更快速地消化吸收(相当于预消化);低过敏性。水解过程中可以破坏蛋白质中的过敏源表位(乳清蛋白中β-乳球蛋白和球蛋白会引起一些人群过敏反应);含有高浓度的必需亮氨酸和支链氨基酸,快速补充能量。
酶学 (E. C.)列出了72种不同的外肽酶(http://www.expasy.ch/enzymes)。外肽酶只是在靠近多链的一侧末端起作用,在游离N端起作用的酶释放出单个的氨基酸残基、二肽或三肽(即分别为氨肽酶、二肽基肽酶和三肽基肽酶);在游离C末端起作用的酶释放出单个的氨基酸残基(羧肽酶)或二肽(二肽基羧肽酶 )。其他外肽酶特异性水解二肽(二肽)或除去被异构肽键替换的、环化的,或交联的末端残基(即不是α羧基与α氨基的肽键)。
绝大多数羧肽酶是金属羧肽酶,一般都是单个多肽链。相对于氨肽酶来说,羧肽酶具有较广的适pH范围(4~8.5)和适温度(25~80℃)。与氨肽酶命名相比,羧肽酶的命名还没有统一的说法,可以根据来源和发现的顺序进行命名,如羧肽酶Y(酵母)、羧肽酶W(小麦)等。也有根据酶对底物作用的特性来命名,如Gly-Xaa羧肽酶、丝氨酸型D-Ala-D-Ala羧肽酶等。由于二者都属于蛋白酶,多数氨肽酶和羧肽酶的活性都会受到EDTA或1,10-邻菲啰啉的抑制,而合成的赖氨酰丙氨酸比EDTA对含锌的羧肽酶A抑制作用更强。
一些氨肽酶和羧肽酶含有糖,但都不含脂蛋白。X射线结晶方法揭示了牛晶状体LAP的三维结构,表明它是一种在活性部位含有2个锌离子的金属酶,而哺乳动物间LAP具有结构相似性,不过也发现牛晶状体LAP和恶臭假单胞菌氨肽酶(ppLAP)之间及其相似,尤其是大肠杆菌和酿酒酵母LAP与牛晶状体LAP有显著的氨基酸序列同源性。酿酒酵母氨肽酶1(Ape1)是一种货物蛋白,在液泡中成熟形式为Ape1 (mApe1),以四面体十二聚合物形式存在。
所有的外肽酶作用的底物N-末端有1个游离的氨基,或者C-末端有1个游离的羧基,或者两种结构都需要,而且,外肽酶从肽链末端水解1个肽键时,释放的残基不会多于3个。多肽末端的特定氨基酸、与肽键相邻的氨基酸残基的性质、多肽链的结构和长度共同决定外肽酶的活性。大多数氨肽酶的适pH值在中性范围,适温度介于37~50℃;与前者相比,羧肽酶具有较宽的作用pH值范围(4.0~8.5)和较宽的温度范围(25~80℃)。