微生物检测，沙门氏菌的检测方法-百检检测

　　微生物检测，沙门氏菌的检测方法-百检检测

　　沙门氏菌是引起食物中毒的重要病原菌。在的各类细菌性食物中毒中，沙门氏菌引起的食物中毒常居。

　　在英国，就以沙门氏菌为，美国则为第二位。我国内陆地区以沙门氏菌为。世界上大的一起沙门氏菌食物中毒是1953年于瑞典由于猪肉引起的鼠伤寒沙门氏菌中毒，7717人中毒，90人死亡。

　　沙门氏菌菌型繁多，已确认的沙门氏菌有 2500 个以上的血清型。繁杂的各类生化反应型，使常规检验程序复杂繁琐、耗时费力，不仅给检验部门带来沉重的负担，而且还使生产部门产品运转和仓贮的时间延长，费用增加。因此，多年来，建立快速而准确的 检测方法一直是沙门氏菌检验研究的核心问题。

　　目前， 主要采用传统标准检测方法、分子生物学方法、学方法、电阻抗法、沙门氏菌显色培养基法等。

　　（一）传统标准检测方法

　　用于检测沙门氏菌的传统方法是将食物样品分步增菌，以增加病原菌的检出率。

　　这种培养方法总体可分为三个不同阶段，预增菌、选择性增菌及分离步骤。 传统沙门氏菌检测法全过程需时至少4~7d,才能得出明确的诊断结果。

　　GB4789.4-94是目前我国规定的对畜产品中沙门氏菌的标准检测方法，主要是根据沙门氏菌的生化特性，进行前增菌、选择性增菌、分离培养、生化鉴定和血清分型五个步骤。在检测畜产品过程中，应注意根据不同的样品采取不同的检测步骤。

　　（二）分子生物学方法

　　近年来，分子生物学技术逐步应用于食品微生物检测中，分子生物学检测方法是针对病原微生物的核酸分子特征进行鉴定，表现出较大的性。

　　扩增片段长度多态性技术 AFLP

　　技术方便快速，实验结果既稳定又可靠。因此， 在微生物研究领域有着极为广泛的应用，但以沙门氏菌为研究对象的报道还很有限。Aarts 等人在对62个血清型的78株Salmonella菌株进行AFLP指纹分析时，发现所有的血清型都具有特AFLP指纹图，并且AFLP指纹具有较高的分辨率，可以区分其他方法无法区分的不同菌株。

　　聚合酶链反应技术

　　PCR 技术因具有简便、快速、敏感性高和特异性强的优点，现已广泛应用于微生物检测、遗传病诊断等领域。Rahn 等设计出一对引物，用 PCR 检测沙门氏菌，检出率为 97﹪，但许多肠道杆菌能同时扩增出来，特异性较差。此后，国内外许多学者进行了利用 PCR 技术检测沙门氏菌的研究。

　　核酸探针

　　目前，检测沙门氏菌属特异性沙门氏菌探针已从鼠伤寒沙门氏菌菌株染色体 DNA 克隆成功，并用于检测食品中沙门氏菌的存在。

　　为此，以核酸杂交为基础的比色计技术目前已发展起来。这种方法依赖于沙门氏菌核糖体 RNA（rRNA）及核糖体发育过程中储存的核酸成分进行检测。这种天然富含 rRNA 标靶序列的情况使得无辐射检测成为可能，同时又保持了与放射性同位素方法相当或更高的敏感性。