大鼠皮肤成纤维细胞

大鼠皮肤成纤维细胞

基本属性：

细胞名称：大鼠皮肤成纤维细胞 

组织来源：皮肤组织

商品货号：LZ-YX9742

种属来源：大鼠

产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

细胞简介：

成纤维细胞属于由中胚层分化而来的间质细胞。  由于这些细胞非常容易培养 ，它 们已经被广泛用于细胞和分子生物学研究中。一般而言 ，成纤维细胞能够分泌I型 和III型胶原等细胞外基质 ，并且研究表明不同器官中的成纤维细胞有显著的不同 。伤口修复时 ，成纤维细胞由可增殖 ，可迁移的表型变为有收缩性的 ，可重 塑基质的表型 ，  同时 ，它们会分泌大量的透明质酸来应对修复时的炎症反应。

培养基：原代成纤维细胞培养体系

换液频率：每2-3天换液一次

生长特性：贴壁生长

细胞形态：长梭形细胞

传代特性：根据细胞特性

消化液：0.25%胰蛋白酶

培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%

使用方法：

大鼠皮肤成纤维细胞是一种贴壁生长细胞，细胞形态呈长梭形细胞，在技术部标准操作流程下，根据细胞特性，建议您收到细胞后尽快进行相关实验。

客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作。

1. 取出T25细胞培养瓶，用75%消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h，以稳定细胞状态。

2. 贴壁细胞消化

1)吸出T25细胞培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；

2)添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中，轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃温浴1-3min；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后，再加入5ml完全培养基终止消化；

大鼠皮肤成纤维型号3)用吸管轻轻吹打混匀，按传代比例接种T25培养瓶传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养；

4)待细胞完全贴壁后，培养观察；之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。          

3. 细胞收货脱落

1)收集所有细胞悬液，1000rpm，离心5min，保留沉淀；

2)添加0.25%胰蛋白酶消化液0.5mL至离心管中，重悬沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱静置5-7min)；消化完向离心管内加入5ml完全培养基终止消化；

3)经1000rpm，离心5min，丢弃上清，用5ml完全培养基(补加1%FBS，促进贴壁)重悬沉淀，接种于新的培养瓶内；

大鼠皮肤成纤维品牌4)待细胞完全贴壁后，培养观察；之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基(37℃预热)。

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CLU Protein Human 重组人 Clusterin / Apolprotein J / Apo-J / CLU 蛋白 (His 标签)

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PCSK9 Protein Rhesus 重组恒河猴 PCSK9 / NARC1 蛋白 (His 标签)

LILRB1重组人 LILRB1 / CD85 / ILT2 / ILR1 蛋白 (His 标签) Protein

原代细胞试用的实验类型：

上海前面我们了解了原代细胞获取和培养过程中应该注意的一些细节，这有助于我们培养我们的原代细胞。那么原代细胞培养好后，它可适用哪些研究呢？

原代细胞不仅广泛应用于分子、细胞生物学和生物医学基础研究，如蛋白质组学、基因组学、细胞株（系）研究、DNA，RNA和遗传学研究等，还可应用于当今热门的生物医药产业如药物筛选、药物代谢和毒理研究、癌症药物的研究等。在这些应用中几乎都涉及了几个常见的且基础的细胞实验，如下：

一、细胞增殖检测：

常见检测方法：CCK8检测法 ，MTT检测法，Brdu检测法，Edu检测法，平板克隆形成

二、细胞周期检测

常见检测方法：流式检测细胞周期，标记有丝分裂百分率法

三、细胞凋亡检测

常见检测方法：流式检测细胞凋亡，线粒体膜电位，活性氧检测，Hoechst染色，电镜，TUNEL

四、细胞转移能力检测

常见检测方法：细胞划痕实验，Transwell实验，Invasion实验