总抗氧化能力(DPPH法)试剂盒微量法说明书
微量法 100管/96样
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
商品属性:
产品名称:总抗氧化能力(DPPH法)试剂盒微量法
货号:LZ-S0165
规格 : 100管/96样
测试方法:微量法
产品分类:氧化与抗氧化系列
发货地:上海
测定意义:
测定对象中各种抗氧化物质和抗氧化酶等构成总抗氧化水平。在生物学、医学和药学研究中常常检测血浆、血清、唾液、尿液等各种体液,细胞或组织等裂解液、植物或中草药抽提液及各种抗氧化物(antioxidant)溶液的总抗氧化能力。
测定原理:
DPPH·为稳定的自由基 ,溶于甲醇,乙醇等极性溶剂中,在515nm处有大吸收。向 DPPH·溶液中加入抗氧化剂时,会发生脱色反应,因此可用吸光度的变化并以Trolox作为对照体系量化抗氧化物质的抗氧化能力。
自备实验用品:
恒温水浴锅、低温离心机、酶标仪、96孔板和蒸馏水。
试剂的组成和配制:
提取液:液体 120mL×1 瓶,4℃保存,使用前预冷。
试剂一:液体 45mL×1 瓶,4℃避光保存。
样品的制备:
(1) 血清、血浆、唾液或尿液等液体样品
血浆(制备时可以使用肝素或柠檬酸钠抗凝,不宜使用 EDTA 抗凝)4℃,5000rpm 离心10min,取上清待测。血清、唾液或尿液样品直接用于测定,也可以-80℃冻存(不宜超过30 d)后再测定。
(2) 组织样品
按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL提取液)进行冰浴匀浆,然后 10000g,4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
(3) 细胞样品
按照细胞数量(104个):提取液体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细胞加入1mL 提取液),冰浴超声波破碎(功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);10000g,4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
生化检测试剂盒操作步骤:
一、准备工具和环境:确保操作台面干净、整洁,这是进行科学实验的步。南京
二、仔细阅读说明书:这是使用试剂盒的基础,说明书包含了所有必要的信息和操作指南。
三、样本采集:按照说明书的指导,正确采集样本。不同类型的检测可能需要不同类型的样本,如血液、唾液或鼻涕等。
四、样本混合:将样本与试剂小心混合,注意轻柔操作,避免产生泡沫,以确保检测的准确性。
五、等待反应:混合后,耐心等待试剂盒的反应,这个时间可以用来进行其他活动,但不要着急,因为好的结果值得等待。
六、结果判读:时间到后,仔细判读结果。试剂盒通常会有明确的指示,告诉你如何根据显示的线条或颜色来判断结果。
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注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。