兔shi网膜色素上皮细胞

细胞名称:兔shi网膜色素上皮细胞

种属来源:兔

组织来源:实验动物的正常眼组织

疾病特征:正常原代细胞

细胞形态:上皮细胞样，不规则细胞

生长特性:贴壁生长

培 养 基:我们推荐使用EliteCell原代上皮细胞培养体系

作为体外培养原代shi网膜色素上皮细胞的培养基。

生长条件:气相：空气，95%；二氧化碳，5%; 温度：37 ℃,

传代方法:1：2至1：6，每周2次。

冻存条件:90% 完全培养基+10% DMSO，液氮储存

细胞鉴定:细胞角蛋白-8(CK-8)荧光染色为阳性，经鉴定细胞纯度90%。

QC检 测:不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。

兔shi网膜色素上皮细胞特点和简介

shi网膜色素上皮位于脉络膜和光感受器细胞外节之间，是shi网膜下腔和脉络膜血管之间的离子、水、营养物质和代谢终产物转运通道。shi网膜色素上皮参与视黄醇循环，吞噬脱落的光感受器细胞外节以维持光感受器细胞兴奋性，并分泌多种生长因子，帮助维持脉络膜血管内皮细胞和光感受器细胞的结构完整性。

兔shi网膜色素上皮细胞接受后处理

1) 收到细胞后，请检查是否漏液 ，如果漏液，请拍照片发给我们。

2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。

3) 弃去T25瓶中的培养基，添加 6ml本公司附带的完全培养基。

4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代，传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。

5) 接到细胞次日，请检查细胞是 否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联系。

兔shi网膜色素上皮细胞培养操作

1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。

3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；

1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。

2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。

3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

本公司，是一家以主营原代细胞,shi网膜色素上皮细胞,上皮细胞企业。上海通蔚实业有限公司位于中国率先大城市——人民共和国直辖市之一的上海，且依托上海张江高科生物研究优势，主要是一家经营elisa试剂盒、检测试剂盒、酶联检测试剂盒等产品的厂家，目前已发展成集科研、生产、销售为一体的创新性企业。