兔前脂肪细胞

细胞名称: 兔前脂肪细胞

种属来源: 兔

组织来源: 实验动物的正常脂肪组织

疾病特征: 正常原代细胞

细胞形态: 梭形细胞，不规则细胞

生长特性: 贴壁生长

培 养 基: 我们推荐使用EliteCell原代前脂肪细胞培养体系

作为体外培养原代前脂肪细胞的培养基。

生长条件: 气相：空气，95%；二氧化碳，5%; 温度：37 ℃,

传代方法: 1：2至1：6，每周2次。

冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO，液氮储存

细胞鉴定: 前脂肪细胞因子-1(Pref-1)荧光染色为阳性，经鉴定细胞纯度90%。

QC检 测: 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。

兔前脂肪细胞特点和简介

脂肪组织在体内有在胞浆内积聚脂滴的成熟脂肪细胞和未在胞浆内积聚脂滴但有这种潜能的前脂肪细胞。前脂肪细胞呈梭形，是一类具有增殖和向脂肪细胞分化能力的特异化了的前提细胞，与肥胖有着非常密切的关系。

兔前脂肪细胞接受后处理

1) 收到细胞后，请检查是否漏液 ，如果漏液，请拍照片发给我们。

2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。

3) 弃去T25瓶中的培养基，添加 6ml本公司附带的完全培养基。

4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代，传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。

5) 接到细胞次日，请检查细胞是 否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联系。

兔前脂肪细胞培养操作

1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。

3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；

1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。

2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。

3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

本公司，是一家以主营原代细胞,兔前脂肪细胞,脂肪细胞企业。上海通蔚实业有限公司位于中国率先大城市——人民共和国直辖市之一的上海，且依托上海张江高科生物研究优势，主要是一家经营elisa试剂盒、检测试剂盒、酶联检测试剂盒等产品的厂家，目前已发展成集科研、生产、销售为一体的创新性企业。