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ELISA的主要常用类型及步骤
间接法测抗体
间接法是检测抗体常用的方法。其原理为利用 瘦素受体(LeptinR)ELISA试剂盒 酶标记的抗抗体(二抗)以检测与固相抗原结合的受检抗体,故称为间接法。
操作步骤如下:
1)将特异性抗原与固相载体联结,形成固相抗原,洗涤除去未结合的抗原及杂质。
2)加稀释的样本,保温反应。样本中的特异抗体与固相抗原结合,形成固相抗原抗体复合物。经洗涤后,固相载体上只留下特异性抗体,样本中的其他成份在洗涤过程中被洗去。
3)加酶标抗抗体。固相复合物中的抗体与酶标抗抗体结合,从而间接地标记上酶。洗涤后,固相载体上的酶量与样本中受检抗体的量正相关。
4)加底物显色。
瘦素受体(LeptinR)ELISA试剂盒 竞争法测抗原:
◎ 小分子抗原或半抗原因缺乏可作夹心法的两个以上的位点,因此不能用双抗体夹心法进行测定,可以采用竞争法模式。其原理是标本中的抗原和一定量的酶标抗原竞争与固相抗体结合。
◎ 标本中抗原量含量愈多,结合在固相上的酶标抗原愈少,的显色也愈浅。小分子激素等ELISA测定多用此法。
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