大鼠肺成纤维细胞-广州黄页88网

上海通蔚实业有限公司面向广州地区用户推荐原代细胞,大鼠肺成纤维细胞,肺成纤维细胞。

细胞名称: 大鼠肺成纤维细胞

种属来源: 大鼠

组织来源: 实验动物的正常肺组织

疾病特征: 正常原代细胞

细胞形态: 长梭状细胞

生长特性: 贴壁生长

培养基: 我们推荐使用EliteCell原代成纤维细胞培养体系

作为体外培养原代成纤维细胞的培养基。

生长条件: 气相：空气，95%；二氧化碳，5%; 温度：37 ℃,

传代方法: 1：2至1：6，每周2次。

冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO，液氮储存

细胞鉴定: 纤维连接蛋白（Fibronectin）荧光染色为阳性，经鉴定细胞纯度90%。

QC检测: 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。

大鼠肺成纤维细胞特点和简介

成纤维细胞是肺间质中含量丰富的细胞种类。这些成纤维细胞与普通的相似，但也有其特有的特征，例如具有很长的伪足和细胞间的间隙连接。肺成纤维细胞的主要功能为分泌肺泡隔基质中的III型胶原，弹性蛋白以及蛋白多糖，也在肺部受损时担任重要的修复和重建功能。肺部受伤后，在炎症部位的一定程度的成纤维细胞积聚是肺部复原的关键步骤，过多或者不足的成纤维细胞聚集都会导致肺功能异常。

大鼠肺成纤维细胞接受后处理

1) 收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。

2) 请先在显微镜下确认细胞生长状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。

3) 弃去T25瓶中的培养基，添加 6ml本公司附带的完全培养基。

4) 如果细胞密度达80%-90%请及时进行细胞传代，传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。

5) 接到细胞次日，请检查细胞是否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联系。

大鼠肺成纤维细胞培养操作

1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入 4mL 培养基混合均匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。

3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。

3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；

1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆脱落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。

2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加入血清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻存管做好标识。

3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。