MRC-5复苏细胞株服务优 "
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公司已合作单位有江苏省中西医结合医院、右江民族医学院附属医院、浙江大学、湖南省实验动物中心、哈尔滨工业大学、中山市人民医院、辽宁中医药大学、复旦大学附属华山医院、暨南大学、上海交大医学院、延边大学、吉林大学、中山大学、天津中医药大学第二附属医院、上海新华医院、山东省中医药研究院、泸州医学院附属医院、河北农业大学动物医学院、清华大学、武汉大学、四川大学、南开大学、山东大学、西安交通大学、厦门大学、东南大学、湖南大学、东北大学、西北大学、西南大学、河海大学、福州大学、首都医科大学、东华大学、辽宁大学、北京中医药大学、哈尔滨医科大学、黑龙江大学、宁夏大学、河北大学、南京医科大学、天津医科大学、中国药科大学、重庆医科大学、石河子大学、安徽医科大学、天津中医药大学、温州医科大学、南京中医药大学、成都中医药大学、大连医科大学、济南大学、广州医科大学、黑龙江中医药大学、新疆医科大学、山西医科大学、湖南中医药大学、安徽医科大学附属医院、北京中医药大学东方医院、广西医科大学附属医院、中国人民解放军总医院、上海交通大学医学院附属瑞金医院、第四军医大学西京医院、中国医科大学附属医院、南方医科大学南方医院、上海交通大学医学院附属仁济医院、第二军医大学长海医院、中南大学湘雅医院、中国医学科学院阜外心血管病医院、江苏省人民医院、首都医科大学附属北京安贞医院、中国医科大学附属盛京医院、南京军区南京总医院、中山大学肿瘤防治中心、上海交通大学医学院附属新华医院、第三军医大学西南医院、第二军医大学长征医院" "
造成实验室细胞污染常见情况总结：
细胞培养中常见污染的是细菌、真菌和支原体污染。细胞一旦污染，大多数较难处理。那么，哪些情况我们不注意的话就会造成细胞污染呢？我们根据常见细胞培养实验分析总结下。
违规操作：1. 为节省时间，有人已经用超净台四个多小时，不开紫外灭菌30min,酒精擦拭后直接开始试验。2. 器材或者溶液很久没用，未检测是否污染而直接使用；离心管多次使用，枪头为了方便交叉使用。3. 超净台不点酒精灯；点了酒精灯放在右上角，而你在左下角做试验。4. 不带手套，徒手操作。5. 细胞培养间配备枪式移液器、手术器械、离心机、冰箱等仪器设备以及的实验服和拖鞋，未定期消毒。物品被带出细胞房使用。培养细胞过程中使用的所有实验用具，如移液管、一次性枪头、一次性塑料离心管、冻存管等未按要求灭菌使用（通常需121°C高压灭菌20分钟后37％烤干备用）。
超净台和桌面，东西太多太乱：超净台不是储物箱，什么培养皿、各种规格的板子、枪头就不要堆在超净台！这样就会有许多紫外线顾不到的卫生死角。细胞房其他的桌面，切忌东西堆积如山，不要将酒精棉球、标签纸、牛皮纸买来后全部堆在细胞房！一不小心“飘”进你的细胞培养板里，细胞就会养的不好，啥时候死了都不知道！
培养箱太久没清洁：细胞污染了，并非直接扔了培养皿就不管了，你还得看看这个恒温培养箱里其他培养皿或孔板里的细胞是否污染，如果有而且好几个板子都有类似的污染块，那很可能是培养箱中的水或者空气污染了，得给培养箱做个大扫除，重新酒精消毒，照紫外；孵箱里的水，水没了要记得加，还得记得十天半个月的就用酒精擦擦托盘。
细胞房人多口杂，难管理：在细胞房这种卫生要求高，人多了，不确定因素多了，难以试验在无菌条件下操作。出入试验室，实验服当风衣穿，不扣纽扣，不戴鞋套，就容易造成细胞污染；超净台做实验时，喜欢说话聊着做试验，要是还不带口罩，里面就有很多细菌等着去攻击你的细胞呢！" "
实验细胞培养基常见问题总结：
培养基是细胞培养中不可缺少的营养成分，但是基础的培养基却给实验者带来了一系列的问题。别小看细胞培养，这里可蕴含着大大的学问。有时候细胞状态不好，接下来的一系列实验根本就没法做。影响细胞培养的因素很多，那就先从培养基开始说起。
培养基常见问题：
1.怎样查到一个特定细胞株的相关知识和培养条件？ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国内外大学细胞库收集了绝大多数细胞的详细资料。细胞数据库中有每一种细胞的详细描述，包括细胞的来源，培养和冻存条件，以及相关文献等资料。
2.液体培养基可以放-20℃保存吗？不可以！因为在-20℃下，培养基中的盐容易析出，培养基融化后，有的盐可能无法重新溶解，从而导致培养基渗透压降低，培养细胞时，细胞容易破裂而死亡。
3.自己新配制的液体培养基能保存多久？我们建议将新配制的培养基放置于4℃，避光保存尽量在一周内使用完毕。培养基越新鲜越好。
4.培养基中添加了血清和抗生素后，可长期保存吗？一旦您在新鲜培养基中添加了血清和抗生素时，您应该在两到三周内使用它。因为一些抗生素和血清中的基本成分在解冻后就开始降解。
5.培养基中是否须添加抗生素？除了特殊筛选系统外，一般正常培养状态下，培养基中不应添加任何抗生素。为防止细菌、真菌污染，可以加入青霉素-链霉素双抗溶液，其培养基中的终浓度为青霉素100U/ml，链霉素为100ug/ml。
6.为何培养基保存于4℃冰箱中，颜色会偏暗红色，且pH值越来越偏碱性？培养基保存于4℃冰箱中， 培养基内之CO2 会逐渐溢出，造成培养基越来越偏碱性。而培养基中之酸碱指示剂(通常为phenol red) 的颜色也会随碱性增加而更偏暗红。培养基偏碱之结果， 将造成细胞生长停滞或死亡。若培养基偏碱时，可以通入无菌过滤之CO2，以调整pH值。
7.培养液pH是怎样影响细胞生长的？由于大多数细胞适宜PH值为7.2-7.4，偏离此范围对细胞将产生有害的影响。各种细胞对PH值要求也不完全相同，原代细胞培养一般对PH值变动耐受差，无限细胞系耐受力强。但总体来说，细胞耐酸性比耐碱性强一些，偏酸环境中更有利于细胞的生长。因此，配制培养用液时可把液体的PH值稍微调的偏酸一些。液体在经过0.1um或0.2um滤膜过滤时，PH值会向上浮动0.2左右。
8.培养液渗透压是怎样影响细胞生长的？当细胞内、外环境的分子浓度不同时就会产生渗透压。这种情况下，水分通过渗透流入或流出细胞，从而改变细胞的内环境。高渗透压迫使水分从细胞中扩散出来导致细胞收缩，这种情况会使DNA和蛋白遭到破坏，细胞周期停滞以及终使细胞死亡；反之，低渗透压使水分流入细胞内，使细胞肿胀破裂。
9.为什么液体培养基1640有时候颜色发黄，是pH值不对吗？不是。因为配方原因，1640为碱酚红型，其中酚红的浓度只有DMEM的四分之一，所以是因为酚红浓度低，而非PH值低。
10.为什么有客户要求培养基中不含酚红？研究表明，酚红可以模拟固醇类激素的作用（特别是雌激素）。为避免固醇类反应，细胞培养，尤其是哺乳类细胞时，用不加酚红的培养基。由于酚红干扰检测，一些研究人员在做流式细胞检测时，不使用加酚红的培养基。" "
几种实验室细胞培养基成分的作用：
1.NaHCO3的作用是什么？与CO2一起形成缓冲系统，保持培养基PH值稳定。
2.丙酮酸钠的作用是什么？丙酮酸钠可以作为细胞培养中的替代碳源，尽管细胞更倾向于以葡萄糖作为碳源，但是如果没有葡萄糖的话，细胞也可以代谢丙酮酸钠。
丙酮酸钠的贮存液浓度一般为50mM，-20℃保存，培养基中的终浓度为1mM.
3.加入HEPES有何好处？培养基中常用的Buffer system是碳酸氢盐，它可提供营养，但却在生理PH值条件下会降低缓冲能力。而HEPES是一种很强的Buffer，加入HEPES能使细胞培养基在PH7.2-7.6条件下缓冲能力增强。Hepes的贮存液浓度一般为1M，常温保存。培养基中的终浓度为25mM，即5ml 1M的Hepes加入到200ml完全培养基中。
4.酚红的作用是什么？酚红在培养基中被用来作为PH值指示剂：中性时为红色，酸性时为黄色，碱性时为紫色。
5.谷氨酰胺的作用是什么？几乎所有的细胞对谷氨酰胺都有胶高的要求。谷氨酰胺脱掉氨基后，可作为培养细胞的能量来源，参与蛋白质的合成和能量代谢。在缺少谷氨酰胺时，细胞生长不良而死亡。所以，各种培养液中都含有较大量的谷氨酰胺。
谷氨酰胺在溶液中很不稳定，应置-20℃冰冻保存，用前加入培养基中。加有谷氨酰胺的液体培养基4度冰箱储存两周以上时，应重新加入原来量的谷氨酰胺。
试验操作中常配制高浓度（100倍）的谷氨酰胺溶液（1ml/支），分装使用，-20℃保存。使用时，每支1ml的谷氨酰胺加入到99ml完全培养基中，使其终浓度为2mM培养基。" "
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C0750 L-540 Hodgkin复苏传代细胞株"本公司，是一家以主营MRC-5复苏企业。公司是国内专注于细胞培养的细胞生物学平台，主要拥有复苏及冻存细胞系及细胞培养相关技术服务，主要为细胞生命科学研究人员提供有效的技术支持、技术培训、售后服务，其细胞系主要来源ATCC、Riken、ScienCell、Invitrogen、ECACC、ACC等细胞库，以及部分国内外细胞研究机构建系。
公司借助强大的细胞系科研团队和销售团队，与国内多家大型综合医院、专科医院、大学科研机构形成长期的细胞培养战略合作伙伴关系。
