产品名称:单孢子虫通用探针法荧光定量PCR试剂盒
英文名称:Haplosporidium spp.
产品货号:LZ-P3629
分类:PCR检测试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
PCR检测试剂盒有效期一般为1年,这是指在适当的储存温度下。单孢子虫通用PCR核酸扩增部分的试剂一般要贮存于-20℃下,产物检测部分试剂则贮存于2-8℃。尽量避免反复冻融。北京
【结果分析条件设定】
u 基线(Baseline)设定:应选择该次实验指数扩增前所有样本荧光信号比较稳定的一段区域(所有样本荧光信号无较大波动),起始点(Start)应避开荧光采集起始阶段的信号波动,终止点(End)应比早出现指数扩增的样本Ct值减少1~3个循环,建议基线设为6~15。
u 阈值(Threshold)设定:将阈值线设定在刚好超过正常阴性质控品扩增曲线的高点。
【质控标准】
1. 阴性质控品的检测结果应为阴性,无指数扩增期,Ct=40或无Ct;
2. 阳性质控品的检测结果应为阳性,有明显的指数扩增期,Ct值应小于等于35;
3. 以上要求需在一次实验中同时满足,否则该次实验视为无效。
【结果判断】
1.阳性:有明显的指数扩增期,且Ct<38;
2.可疑:有明显的指数扩增期,且38≤Ct<40,此时样本为可疑样本;对于可疑样本建议复核一次,若复核结果Ct<40且有指数扩增期,则判定为阳性,否则判定为阴性;
3. 阴性:无指数扩增期,Ct=40或无Ct值均判定为阴性样本。
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 单孢子虫通用试剂灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4)对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
公司正在出售的产品:
人溴脱氧核苷尿嘧啶(BrdU)ELISA
猪趋化因子配体28(CCL28)试剂盒 Pig chemokine(C-C motif)ligand 28(CCL28)ELISA kit
HumanCoicosterone,COELISAKit 人皮质酮/肾上腺酮(CO)PCR检测试剂盒
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HumanHeatShockProtein20,HSP-20ELISAKit人热休克蛋白20(HSP-20)PCR检测试剂盒
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豚鼠嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)试剂盒 Guinea Pig eosinophil cationic protein,ECP ELISA Kit
糖蛋白49A(Gp49a)PCR检测试剂盒 , Gp49a ELISA Kit
MouseTestoterone,TPCR检测试剂盒小鼠睾同(T)PCR检测试剂盒
Chickenverylowdensitylipoprotein,VLDLPCR检测试剂盒鸡极低密度脂蛋白(VLDL)PCR检测试剂盒
HumanAlanineAminoansferase,ALT/GPTELISAKit人酸转酶/谷转酶(ALT/GPT)PCR检测试剂盒
单孢子虫通用探针法荧光定量PCR试剂盒5HT1F Receptor: 5-羟色胺受体1F抗体 0.2ml
phospho-ERK1 (Thr197 +Thr202): 0酸化原活化蛋白激酶1/2抗体 0.1ml
胶质细胞系源性神经营养因子受体β抗体 Anti-TmR2 0.2ml
Anti-TNF- Alpha /HRP 辣根过氧化物酶标记坏死因子抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-JunB(Ser259) 0酸化活化蛋白激酶B抗体 规格 0.1ml
PLGF (Placenta growth factor) 小鼠胎盘生长因子(多肽抗原)Multi-class antibodies规格: 0.5mg
PCR检测步骤:
1、样品处理
1)按照GB 4789.10-2016(或SN/T 1870-2016),取样品25g(mL),加入到含有225mL 7.5% NaCl肉汤的无菌容器中均质,调节pH至6.8±0.2。
2)36±1℃培养18-24h。
注:也可参考其他地方标准进行样品的前处理。
2、核酸提取
1)取40μL增菌液于裂解液管中,98℃或沸水浴10min。
2)冷却至室温,吸取上清备用或者置于-20℃保存。
3、反应体系配置
从试剂盒中取出SA预混液,充分融化,短暂离心,然后将阴性对照、样品的DNA提取液、阳性对照各取5μL分别加入PCR管中,盖好管盖,短暂离心,立即进行PCR扩增反应。
4、PCR扩增
PCR管置于PCR仪上,推荐反应程序设定如下:反应体系为25μL,在第二步每个循环60℃时检测荧光信号,检测通道选择FAM。
本公司,是一家以主营单孢子虫通用PCR,单孢子虫通用试剂企业。"上海联祖生物科技有限公司Shanghai RayzBio Biotechnology Co., Ltd成立于2020年,坐落于中国魔都上海,提供生物试剂、试剂、生化试剂、实验仪器及耗材、制药工业及原料、细胞培养试剂和科研诊断等各类科研产品,供应于生命科学基础开发研究、疾病诊断与制药、生物技术、卫生与健康等诸多领域。
本着“质量至上、服务至上”的理念,公司范围涉及全国所有省市自治区,为广大科研用户提供、及的产品及服务!